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2021 年度 実績報告書

ウイルス感染における糖鎖リモデリングの意義解明に向けた技術基盤の構築

研究課題

研究課題/領域番号 18K15176
研究機関北海道大学

研究代表者

日尾野 隆大  北海道大学, 獣医学研究院, 講師 (00775819)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2022-03-31
キーワードウイルス糖タンパク質 / 糖鎖 / レクチンマイクロアレイ / グライコプロテオミクス / グライコフォーム
研究実績の概要

2021年度にCOVID-19の発生及びSARS-CoV-2の出現に伴って、緊急的に実験計画を変更し、SARS-CoV-2のSタンパク質に付加する糖鎖の解析に取り組んだ。本年は2021年度にCOVID-19の影響で行うことができなかった成果の発信として、関連学会(インフルエンザ研究者交流の会シンポジウム、日本ウイルス学会学術集会および日本獣医学会学術集会、すべてオンラインで開催)での口頭発表を行った。また、新たにSARS-CoV-2のVariant of concern変異株1株について、Sタンパク質についてレクチンアレイ法と液体クロマトグラフィー質量分析(LC-MS)を組み合わせた糖鎖分析を実施した。その結果、すでに解析済みの武漢型株と比較して、Sタンパク質に付加する糖鎖の末端構造に一部傾向の違いが認められた。そこで、武漢型株と変異株が感染した細胞では糖鎖合成機構にどのような変化が生じているか比較解析するため、現在、ウイルス感染細胞における糖転移酵素遺伝子の発現解析を実施している。当該末端糖鎖構造の合成に関与する、多数ある糖鎖関連遺伝子の中から、ターゲットとする遺伝子を絞り込むために、公的なデータベースにデポジットされているRNAseqのデータを二次解析し、SARS-CoV-2の感染によって変動が認められる糖転移酵素遺伝子をリスト化した。予備的な検討から、これらの遺伝子を検出する定量PCRの系の確立までは完了しているが、微量な糖転移酵素遺伝子mRNAを定量的に解析するプロトコルの確率に難航している。遺伝子定量が完了し次第、成果を論文としてまとめていく予定である。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2021

すべて 学会発表 (4件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件)

  • [学会発表] 質量分析とレクチンアレイを組み合わせた SARS-CoV-2 スパイクタンパク質の高精度糖鎖構造解析2021

    • 著者名/発表者名
      日尾野隆大、富岡あづさ、梶裕之、佐々木道仁、大場靖子、澤洋文、久野敦
    • 学会等名
      第34回インフルエンザ研究者交流の会シンポジウム
  • [学会発表] 質量分析とレクチンアレイを組み合わせた SARS-CoV-2スパイクタンパク質の高精度糖鎖構造解析2021

    • 著者名/発表者名
      日尾野隆大、富岡あづさ、梶裕之、佐々木道仁、大場靖子、澤洋文、久野敦
    • 学会等名
      第164回日本獣医学会学術集会
  • [学会発表] Combinatorial approach with mass spectrometry and lectin microarray dissected glycoproteomic features of virion-derived spike protein of SARS-CoV-22021

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Hiono, Azusa Tomioka, Hiroyuki Kaji, Michihito Sasaki, Hiroaki Sakaue, Yasuko Orba, Hirofumi Sawa, Atsushi Kuno
    • 学会等名
      The 68th Annual Meeting of the Japanese Society for Virology
  • [学会発表] Glycoscientific approaches toward understanding the host preference of avian influenza viruses2021

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Hiono
    • 学会等名
      The 6th One Health Lecture Series on Solutions to Global One Health Challenges Towards Human Animals and Environmental Health
    • 国際学会 / 招待講演

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公開日: 2022-12-28  

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