GISTにおける脱リン酸化酵素活性およびKIT転写活性に着目した新規治療法の探索

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K15329
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 大久保 武人 順天堂大学, 医学部, 助教 (90732884)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: GIST / PP2A / KCTD12 / KIT

研究実績の概要

KITやPDGFRA変異を有するGISTにおいては、チロシンキナーゼ阻害剤が有効であるが、二次性のRTK変異獲得に代表されるチロシンキナーゼ阻害剤抵抗性が大きな 問題である。グループでは、脱リン酸化酵素の1つであるPP2Aに変異があるとa)GIST患者の予後が不良となり、b)発がん因子KITの自己リン酸化亢進をさせ、更に はc)悪性化能獲得に関与することを示してきた。さらに、GISTにおいて予後良好因子であるpfetin (KCTD12)と 発がん因子であるKITの間には、遺伝子・タンパ ク質発現量に関してお互いに干渉していることを同定しており、GIST細胞が過剰な増殖サイクルに入る現象から回避している可能性を見出している。本研究では それらの先行発見に基づいて、GISTにおける1) 発がん因子であるKIT, KCTD12の発現制御機構の解析と、2) 脱リン酸化酵素賦活剤の投与による抗腫瘍効果を検討し、予後予測や薬剤奏功性のバイオマーカー・新規治療標的としての可能性を探索し、臨床応用を目指している。
前年度に引き続き、GIST 臨床検体におけるKIT 発現量の予後因子としての可能性の検証として、順天堂大学医学部附属順天堂医院病理部に蓄積されているGIST 約100 例の ホルマリン固定パラフィン包埋検体(FFPE)を用いてDNA/RNAを抽出し、KIT変異を有するGISTにおけるKIT発現量定量とPPP2R1A 変異有無の確認を行った。それらの発現、変異データは臨床病理学的因子との解析を進めその特徴の同定を試みた。またKIT及びKCTD12に関わるタンパク質発現プロファイリングの作成に成功した。 また、GIST細胞株における各治療標的候補の抗腫瘍作用の検証を進めた。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

前年度に引き続き、GIST 臨床検体におけるKIT 発現量の予後因子としての可能性の検証として、順天堂大学医学部附属順天堂医院病理部に蓄積されているGIST 約100 例の ホルマリン固定パラフィン包埋検体(FFPE)を用いてDNA/RNAを抽出し、KIT変異を有するGISTにおけるKIT発現量定量とPPP2R1A 変異有無の確認を行った。それらの発現、変異データは臨床病理学的因子との解析を進めその特徴の同定を試みた。またKIT及びKCTD12に関わるタンパク質発現プロファイリングの作成に成功した。また、GIST細胞株における各治療標的候補の抗腫瘍作用の検証を進めた。PPP2R1Aのプロファイリング作成に難渋しており。そのためやや遅れた評価となる。

今後の研究の推進方策

来年度もGIST臨床検体のコホート作成を引き続き進め、KIT 、PPP2R1A、KCTD12の発現プロファイリングを進め、またKIT及びKCTD12に関わるタンパク質発現プロファイリングの作成・解析も引き続き進める。また、GITS細胞株における各治療標的候補の抗腫瘍作用の検証を引き続き進める。

次年度使用額が生じた理由

前年度に引き続き、GIST 臨床検体におけるKIT変異を有するGISTにおけるKIT発現量定量とPPP2R1A 変異有無の確認を行った。それらの発現、変異データは臨床病理学的因子との解析を進めその特徴の同定を試みた。またKIT及びKCTD12に関わるタンパク質発現プロファイリングの作成に成功した。また、GITS細胞株における各治療標的候補の抗腫瘍作用の検証を進めた。PPP2R1Aのプロファイリング作成に難渋しており。それらが次年度使用額の生じた理由となる。

研究成果

• [雑誌論文] Protein Expression Profiles Corresponding to Histological Changes with Denosumab Treatment in Giant Cell Tumors of Bone (2019)
  • 著者名/発表者名: Suehara Yoshiyuki、Okubo Taketo、Kurihara Taisei、Hayashi Takuo、Kohsaka Shinji、Kazuno Saiko、Sano Kei、Hasegawa Nobuhiko、Miura Yoshiki、Akaike Keisuke、Kim Youngji、Takamochi Kazuya、Takahashi Fumiyuki、Ueno Takashi、Kaneko Kazuo、Saito Tsuyoshi
  • 雑誌名: PROTEOMICS Clinical Applications 巻: 13 ページ: 1800147～1800147
  • DOI: 10.1002/prca.201800147
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of circulating sarcoma tumor cells using a microfluidic chip-type cell sorter (2019)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa Nobuhiko、Takeda Nakamura Ikuko、Ueno Toshihide、Kojima Shinya、Kawazu Masahito、Akaike Keisuke、Okubo Taketo、Takagi Tatsuya、Suehara Yoshiyuki、Hayashi Takuo、Saito Tsuyoshi、Kaneko Kazuo、Mano Hiroyuki、Kohsaka Shinji
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 ページ: 20047
  • DOI: 10.1038/s41598-019-56377-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preoperative denosumab treatment with curettage maybe a risk factor for recurrence of giant cell tumor of bone (2019)
  • 著者名/発表者名: Sano K, Suehara Y, Okubo T, Sasa K, Kurihara T, Akaike K, Kubota D, Torigoe T, Hasegawa N, Ishii M, Y Nakamura, Kim Y, Takagi T, Kaneko K, Hayashi T, Saito T
  • 雑誌名: Journal of Orthopaedic Surgery 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Assessment of Predictive Biomarkers of the Response to Pazopanib Based on an Integrative Analysis of High-grade Soft-tissue Sarcomas. (2019)
  • 著者名/発表者名: Suehara Y, Kohsaka S, Yamaguchi S, Hayashi T, Kurihara T, Akaike K, Ueno T, Kojima S, Ikegami M, Mizuno S, Okubo T, Kim Y, Kaneko K, Saito T, Kato S, Mano H
  • 雑誌名: Clin Orthop Relat Res. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Squamous cell carcinoma arising from chronic osteomyelitis massively expanding into the medullary cavity: A case report. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kurihara T, Suehara Y, Akaike K, Hayashi T, Okubo T, Kim Y, Takagi T, Kaneko K, Yao T, Saito T.
  • 雑誌名: Human Pathology Case reports 巻: 16 ページ: 100289
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fibrocartilaginous mesenchymoma of the tibia with predominant microcystic features: A case report and literature review (2019)
  • 著者名/発表者名: Saito T, Motoi T, Suehara Y, Takagi T, Okubo T, Kurihara T, Hayashi T, Kudo T, Maruyama Y, Kaneko K, YaoT.
  • 雑誌名: Human Pathology Case reports 巻: 16 ページ: 100288
  • 査読あり
• [学会発表] Comparative analysis of protein profiles of prognosis-associated proteins and KIT-related proteins in gastrointestinal stromal tumor (2019)
  • 著者名/発表者名: Suehara Y, Sasa K, Okubo T, Hayashi T, Sano K, Kurihara T, Akaike K, Ishii M, Kim Y, Kaneko K, Saito T.
  • 学会等名: European Society For Medical Oncology – ASIA, Nov 22-24th 2019, Singapore, Singapore
  • 国際学会
• [学会発表] NanoString analyses of tyrosine kinase fusion genes in IMT / IPT (2019)
  • 著者名/発表者名: Kurihara T, Suehara Y, Sano K, Akaike K, Hayashi T, Kohsaka S, Hasegawa N, Takagi T, Okubo T, Yao T, Kaneko K Saito T
  • 学会等名: Connective Tissue Oncology Society, 24th Annual Meeting, November 13-16, 2019, Tokyo, Japan
  • 国際学会
• [学会発表] Protein expression analysis by regulating c-kit and KCTD12 expression in Gastrointestinal stromal tumor. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sasa K, Suehara Y, Okubo T, Hayashi T, Sano K, Kurihara T, Akaike K, Ishii M, Kim Y, Kaneko K, Saito T.
  • 学会等名: Connective Tissue Oncology Society, 24th Annual Meeting, November 13-16, 2019, Tokyo, Japan
  • 国際学会
• [学会発表] High-throughput analysis of transcriptional starting point and identification of promoter usage in spindle cell sarcomas. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sano K, Suehara Y, Hayashi T, Kurihara T, Akaike K, Oguchi A, Takagi T, Kim Y, Okubo T, Murakawa Y, Kaneko K, Saito T.
  • 学会等名: Connective Tissue Oncology Society, 24th Annual Meeting, November 13-16, 2019, Tokyo, Japan
  • 国際学会
• [学会発表] Relationship with adriamycin-resistant osteosarcomas and the pentose phosphate pathway using metabolomic approaches (2019)
  • 著者名/発表者名: Sasa K, Suehara Y, Akaike K, Hayashi T, Taka H, Kim Y, Okubo T Kaneko K, Saito T.
  • 学会等名: 20th International Symposium on Limb Salvage, 11-13, September 2019, Athens, Greek
  • 国際学会