血小板と感染症を結びつけるmicroRNAの機能解明

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K15395
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 郡山 豊泰 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 臨床検査技師 (60723616)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: microRNA / マクロファージ / サイトカイン / RICTOR

研究実績の概要

本申請では、細菌感染した免疫細胞からのmicroRNAが血小板へ与える細胞間コミュニケーションのツールとしてなり得るかを知る前段階として「レジオネラ菌感染がマクロファージに及ぼす形質変化の分子機序解明」を目的とし、次の2点についてin vitroで検討をおこなった。
(1) L. pneumophila をマクロファージ（宿主）に感染させたときのマクロファージのmiRNA発現量の量的・質的変化を検討した。
(2) 得られた結果よりmiR-218に注目し、miR-218がL. pneumophila 感染したマクロファージにどのような機能変化をもたらすかを検討した。
細胞実験は、ヒト単核球系細胞 (U937細胞)を使用し、phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA: 50ng/mL)で2日間分化させたものをマクロファージ様細胞として使用した 。miRNAおよびmRNAの発現はリアルタイムＰＣＲを使用した。蛋白質発現の評価は、ウェスタンブロット法を用いた。今回、miR-218のターゲットとしたRICTORは、mTOR複合体のmTORC2の構成タンパク質の一つである。RICTORのノックダウンおよびmiR-218の発現増強、減弱には、Lipofectamine RNAiMAX とRICTOR silencing RNAおよびmiR-218 mimics・miR-218 inhibitorを細胞内に導入し、細胞機能変化を解析した。
今回、申請者はL. pneumophila 感染によるマクロファージのサイトカイン産生の制御に、miR-218が関与することと、miR-218で発現が抑制されるRICTORの役割を初めて明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Legionella pneumophila infection-mediated regulation of RICTOR via miR-218 in U937 macrophage cells (2019)
  • 著者名/発表者名: Koriyama Toyoyasu、Yamakuchi Munekazu、Takenouchi Kazunori、Oyama Yoko、Takenaka Hiroyoshi、Nagakura Takumi、Masamoto Izumi、Hashiguchi Teruto
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 508 ページ: 608-613
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2018.11.093
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Liver abscess due to Sterigmatomyces halophilus in a boy with acute lymphoblastic leukemia. (2019)
  • 著者名/発表者名: Imashioya T, Kodama Y, Ooka T, Nakagawa S, Nishikawa T, Tanabe T, Okamoto Y, Imuta N, Kirishima M, Tanimoto A, Koriyama T, Nishi J, Kawano Y.
  • 雑誌名: J Infect Chemother 巻: 25 ページ: 1047-1049
  • DOI: 10.1016/j.jiac.2019.05.021
  • 査読あり