脈管異常に合併する凝固異常の病態解明と治療薬開発

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K15704
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 遠渡 沙緒理 岐阜大学, 医学部附属病院, 助教 (90816117)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 脈管腫瘍

研究実績の概要

脈管異常は、いわゆる“血管腫”と称される血管及びリンパ管による、先天性の脈管異常疾患で、血管腫内で異常な血液凝固が起こり、血小板減少や血栓を形成するが、そのメカニズムは未だ不明である。特に小児血管性腫瘍に合併するカサバッハメリット現象(Kasabach-Merritt Phenomenon: KMP)は重篤な凝固異常を呈し、致死率も高いが、対症療法のみとなっている。我々は他の脈管異常に合併する凝固異常とKMPとの違いに着目し、新たな病態を考案した。さらに、その病態を克服する治療薬の開発に結びつけるため、疾患毎に凝固異常の病態が異なることの証明、KMP、Kaposiform lymphangiomatosis(KLA)の凝固異常とポドプラニン陽性細胞の関連性、mTOR阻害剤であるシロリムスの凝固異常に対する有効性のProof of conceptを研究する。
凝固異常のある脈管異常症例の血液を用いて、CLEC-2、血管・リンパ管新生に関わるマーカー（VEGF-A、C、D、MMP2、9、 Angiopoietin1、2、BMP-9、EGF、Endoglin、Endothelin-1、FGF-1、FGF-2、Folistatin、HB-EGF、PLGFなど）などをELISA測定キット（R＆Dなど）およびマルチプレックスアッセイシステムを用いた解析パネル（MILLIPLEX）によって解析したところ、特定の病態に有意に高いサイトカインを検出した。本研究結果については、国際誌に投稿し、修正中である。
また細胞株および正常血管内皮細胞株を培養し、シロリムスを添加し、細胞増殖アッセイを行、治療後の細胞周期、および細胞内のアポトーシス蛋白の発現をウエスタンブロット法、定量的RT－PCRで評価した。また治療後のmTORおよびリン酸化mTOR蛋白の発現なども測定した。来年度はさらに研究を進める。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

計画通りに進捗

今後の研究の推進方策

計画通り、来年度はさらに細胞を使用した解析おもび、凝固因子との関連性を検討する。

次年度使用額が生じた理由

来年度に新たに必要な経費が出たため（細胞実験関係）、来年度に繰り越した。

研究成果

• [雑誌論文] Fatal progression of Gorham-Stout disease with skull base osteomyelitis and lateral medullary syndrome. (2019)
  • 著者名/発表者名: 11.Nozawa A, Ozeki M, Hori T, Kato H, Ohe N, Fukao T.
  • 雑誌名: Internal Med.
  • DOI: https://doi.org/10.2169/internalmedicine.2118-18
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Generalized lymphatic anomaly and Gorham-Stout disease: overview and recent insights. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ozeki M, Fukao T
  • 雑誌名: Advance Wound Care.
  • DOI: org/10.1089/wound.2018.0850
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Efficacy of sirolimus in an infant with Kasabach-Merritt phenomenon. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kumagai C., Ozeki M., Nozawa A., Kakuda H., Fukao T.
  • 雑誌名: Pediatr Int. 巻: 60 ページ: 887-889
  • DOI: 10.1111/ped.13630.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Efficacy and safety of sirolimus treatment for intractable lymphatic anomalies: a study protocol for an open-label, single-arm, multicenter, prospective study (SILA) (2018)
  • 著者名/発表者名: Ozeki M, Asada R, Saito A, Hashimoto H, Fujimura T, Kuroda T, Ueno S, Watanabe S, Nosaka S, Miyasaka M, Umezawa A, Matsuoka K, Maekawa T, Yamada Y, Fujino A, Hirakawa S, Furukawa T, Tajiri T, Kinoshita Y, Souzaki R, Fukao T.
  • 雑誌名: Regen Ther. 巻: 10 ページ: 84-91
  • DOI: 10.1016/j.reth.2018.12.001
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Kasabach-Merritt phenomenonに対するmTOR阻害剤の有効性と安全性について. (2018)
  • 著者名/発表者名: 遠渡沙緒理, 野澤明史, 安 志保, 木村豪, 小関道夫, 深尾敏幸.
  • 学会等名: 日本血管腫血管奇形学会（第15回）
• [学会発表] Differences in clinical findings and plasma cytokine profiles between generalized lymphatic anomaly and kaposiform lymphangiomatosis. (2018)
  • 著者名/発表者名: 16.Ozeki M, Nozawa A, Kawamoto N, Fujino A, Hirakawa S, Fukao T.
  • 学会等名: The 22nd International Workshop of the International Society for the Study of Vascular Anomalies.
  • 国際学会