炎症性腸疾患に対して腸管保護作用を有するプロバイオティクス由来の新規物質の探索

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K15770
• 研究機関: 旭川医科大学
• 研究代表者: 井尻 学見 旭川医科大学, 大学病院, 客員助教 (00646078)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: LCN2 / Siderophore / プロバイオティクス

研究実績の概要

Lipocalin2(LCN2)は腸管上皮や好中球から分泌される蛋白であり，細菌が分泌する金属キレート分子Siderophoreと結合し，細菌の鉄獲得を阻害する。その際形成されるSiderophore-LCN2複合体は，菌による免疫阻害作用や過度の炎症から細胞を保護することが知られている．しかし，LCN2と結合する菌由来siderophoreは数種類しか同定されておらず，腸管上皮におけるSiderophore-LCN2複合体の認識機構や作用機序は不明である．本研究では，ヒトに対して安全なプロバイオティクスから，LCN2と結合し抗炎症作用を発揮する結合物質を同定し，その作用機序を解明する．これによりプロバイオティクス由来物質とヒト由来LCN2による複合体形成を介した新しいhost-microbe interactionの学術分野が創造されるとともに，この複合体を用いた新規腸炎治療薬開発の基盤的成果を得ることを目的として研究を推進している．これまでに、His-tag標識リコンビナントLCN2を用いて腸管保護作用を有する乳酸菌株であるL. brevisを同定し、L. brevisが分泌するSiderophore類との相互作用を解析している。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の予定通りに腸管保護作用を持つ乳酸菌株L. brevisの培養上清を回収した。この培養上清にLCN2リコンビナントタンパクを添加し、免疫沈降法により培養液からのLCN2結合物質の抽出実験を行った。現在、抽出したLCN2結合物質をHPLCによりスペクトラム解析を行っている。現在、それぞれの分離フラクション中に存在する分子について腸管保護作用が発揮されるかを検討しているところである。

今後の研究の推進方策

腸管保護作用を発揮するプロバイオティクス株の探索は継続して推進する。強い腸管保護作用が認められたプロバイオティクスの培養液にLCN2リコンビナントタンパクを添加し、免疫沈降法によりLCN相互作用分子を探索する。それぞれのHPLC分離フラクション中に存在するLCN2結合分子の腸管保護作用や抗炎症作用を検討していく。トランスクリプトーム解析やプロテオーム解析を行い、LCN2結合分子の腸管保護メカニズム解析を推進する。

研究成果

• [雑誌論文] Autofluorescence Imaging Reflects the Nuclear Enlargement of Tumor Cells as well as the Cell Proliferation Ability and Aberrant Status of the p53, Ki-67, and p16 Genes in Colon Neoplasms. (2019)
  • 著者名/発表者名: Moriichi K, Fujiya M, Kobayashi Y, Murakami Y, Iwama T, Kunogi T, Sasaki T, Ijiri M, Takahashi K, Tanaka K, Sakatani A, Ando K, Nomura Y, Ueno N, Kashima S, Ikuta K, Tanabe H, Mizukami Y, Saitoh Y, Okumura T.
  • 雑誌名: Molecules 巻: 24(6) ページ: 1106
  • DOI: 10.3390/molecules24061106.
  • 査読あり
• [雑誌論文] hite coat status is a predictive marker for post-esophageal endoscopic submucosal dissection stricture: a retrospective study. (2019)
  • 著者名/発表者名: Takahashi K, Fujiya M, Ueno N, Saito T, Sugiyama Y, Murakami Y, Iwama T, Sasaki T, Ijiri M, Tanaka K, Sakatani A, Ando K, Nomura Y, Kashima S, Goto M, Moriichi K, Okumura T.
  • 雑誌名: Esophagus. 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1007/s10388-019-00659-y.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Incidence and Risk Factors of Venous Thromboembolism in Patients with Inflammatory Bowel Disease: A Prospective Multicenter Cohort Study. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ando K, Fujiya M, Nomura Y, Inaba Y, Sugiyama Y, Kobayashi Y, Iwama T, Ijiri M, Takahashi K, Ueno N, Kashima S, Moriichi K, Tanabe H, Mizukami Y, Akasaka K, Fujii S, Yamada S, Nakase H, Okumura T.
  • 雑誌名: Digestion. 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1159/000495289.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The incidence and risk factors of venous thromboembolism in Japanese inpatients with inflammatory bowel disease: a retrospective cohort study. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ando K, Fujiya M, Nomura Y, Inaba Y, Sugiyama Y, Iwama T, Ijiri M, Takahashi K, Tanaka K, Sakatani A, Ueno N, Kashima S, Moriichi K, Mizukami Y, Okumura T.
  • 雑誌名: Intest Res. 巻: 16(3) ページ: 416-425
  • DOI: 10.5217/ir.2018.16.3.416.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Takayasu's arteritis associated with eosinophilic gastroenteritis, possibly via the overactivation of Th17. (2018)
  • 著者名/発表者名: Fujiya M, Kashima S, Sugiyama Y, Iwama T, Ijiri M, Tanaka K, Takahashi K, Ando K, Nomura Y, Ueno N, Goto T, Moriichi K, Mizukami Y, Okumura T, Sasajima J, Fujishiro D, Okamoto K, Makino Y.
  • 雑誌名: Gut Pathog. 巻: 10:22 ページ: -
  • DOI: 10.1186/s13099-018-0251-z
  • 査読あり
• [学会発表] 通常内視鏡およびAFIによる潰瘍性大腸炎の再燃予測 (2018)
  • 著者名/発表者名: 小林 裕, 井尻 学見, 盛一 健太郎, 齊藤 成亮, 岩間 琢哉, 高橋 慶太郎, 安藤 勝祥, 野村 好紀, 上野 伸展, 嘉島 伸, 藤谷 幹浩, 奥村 利勝
  • 学会等名: JDDW2018
• [学会発表] FAP患者における胃底腺ポリポーシス合併早期胃癌の1例 - NBIの有用性を中心に (2018)
  • 著者名/発表者名: 小林裕, 高橋慶太郎, 杉山雄哉, 岩間琢哉, 井尻学見, 安藤勝祥, 野村好紀, 上野伸展, 嘉島伸, 盛一健太郎, 水上裕輔, 藤谷幹浩, 奥村利勝
  • 学会等名: 第116回日本消化器内視鏡学会北海道支部例会
• [学会発表] リンパ節からのEUS-FNAにて診断し得たエキノコックス症の一例 (2018)
  • 著者名/発表者名: 堀内正史, 野村好紀, 小林裕, 杉山雄哉, 岩間琢哉, 佐藤裕基, 井尻学見, 高橋慶太郎, 河端秀賢, 林明宏, 安藤勝祥, 上野伸展, 後藤拓麿, 嘉島伸, 笹島順平, 盛一健太郎, 藤谷幹浩, 奥村利勝
  • 学会等名: 第121回日本消化器病学会北海道支部例会
• [学会発表] 大腸上皮性腫瘍に対する自家蛍光内視鏡の組織学的・分子生物学的特徴の予測 (2018)
  • 著者名/発表者名: 岩間琢哉, 盛一健太郎, 齊藤成亮, 杉山雄哉, 佐藤裕基, 岡田哲弘, 井尻学見, 高橋慶太郎, 河端秀賢, 林明宏, 安藤勝祥, 野村好紀, 上野伸展, 嘉島伸, 後藤拓磨, 笹島順平, 水上裕輔, 藤谷幹浩, 奥村利勝
  • 学会等名: 第121回日本消化器病学会北海道支部例会
• [学会発表] 消化管病変に起因する脾腫によって汎血球減少を呈したクローン病の一例 (2018)
  • 著者名/発表者名: 齊藤成亮, 上野伸展, 小林裕, 杉山雄哉, 岩間琢哉, 佐藤裕基, 井尻学見, 高橋慶太郎, 河端秀賢, 林明宏, 安藤勝祥, 野村好紀, 後藤拓磨, 嘉島伸, 盛一健太郎, 水上裕輔, 藤谷幹浩, 奥村利勝
  • 学会等名: 第121回日本消化器病学会北海道支部例会
• [学会発表] QOLの観点から検討したインフリキシマブバイオシミラー投与の妥当性 (2018)
  • 著者名/発表者名: 杉山雄哉, 上野伸展, 小林裕, 岩間琢哉, 佐藤裕基, 井尻学見, 高橋慶太郎, 安藤勝祥, 林明宏, 川端秀賢, 野村好紀, 嘉島伸, 後藤拓磨, 笹島順平, 高氏修平, 盛一健太郎, 水上裕輔, 藤谷幹浩, 奥村利勝
  • 学会等名: 第121回日本消化器病学会北海道支部例会