| 研究課題/領域番号 |
18K15771
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| 研究機関 | 山形大学 |
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研究代表者 |
星川 恭子 山形大学, 医学部, 助教 (20613053)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 非アルコール性脂肪性肝炎 |
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| 研究実績の概要 |
申請者らの最終目的は、脂肪性肝疾患における肝再生の分子生物学的機構を明らかにすることであるが、本研究では基礎的検討として脂肪性肝疾患マウスモデル動物を用いて NAFLD における肝切除後の肝再生のメカニズムを解明することを目的としている。
昨年度は、食餌負荷による正常、単純性脂肪肝および NASH マウスモデルを確立することを目的とし実験を行った。結果、FFC食餌負荷20週のマウスでは組織学的に肝内の炎症と線維化を伴うNASHが誘導されていたことを確認しNASHマウスモデルを確立できた。
今年度は、これら高脂肪食餌負荷マウスの肝内炎症および線維化について、遺伝子発現につていもを解析するとともに、肝内の肝再生に関与する遺伝子発現についてもを解析することを目的として実験を行った。具体的にはNASH肝内炎症の遺伝子発現レベルを確認するため、TNFα、線維化の遺伝子発現を確認するためTGF－β、肝再生に関与すると予想されているEpiregulin遺伝子発現について、リアルタイムPCRを用いて解析している。これらNASHモデルマウス肝の遺伝子発現については、リアルタイムPCR法を用い解析中であるが、プライマー設計などに時間がかかり、未だ解析中である。
次年度以降も、今年度の遺伝子発現解析を継続するとともに、高脂肪食餌負荷マウス肝の肝再生にかかわる遺伝子発現について、次世代シーケンサーを利用した網羅的な解析も予定している。最終的には肝再生に強く関与する分子の特定に至れば、阻害薬投与あるいは当該遺伝子欠損マウスを用い、NASHマウスモデルにおける肝再生の促進効果などについて検討することができると考えている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
脂肪性肝疾患における肝再生の分子生物学的機構を明らかにすることを目的とした本研究においては、今年度は具体的な肝再生の分子生物学的機構の解析を目的としていた。
具体的には、昨年度に組織学的に確認できたFFC食餌マウス肝におけるNASH肝内炎症の遺伝子発現レベルを確認するため、TNFα、線維化の遺伝子発現を確認するためTGF－β、肝再生に関与するEpiregulin遺伝子発現について、リアルタイムPCRを用いて解析しているところである。PCRに用いるプライマーの設定に時間がかかり、予備実験を行いながら未だ解析を続けている段階である。
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| 今後の研究の推進方策 |
昨年度の研究では、FFC食餌負荷によるNASHマウスモデルを確立することができ、今年度は肝内の肝再生に関与する遺伝子発現レベルについて解析を開始した段階である。今年度も引き続き関与する遺伝子発現についてリアルタイムPCRを用いて解析を継続していく一方、高脂肪食餌負荷マウス肝の肝再生にかかわる遺伝子発現について、次世代シーケンサーを利用した網羅的な解析も予定している。
さらに、最終的には肝再生に強く関与する分子の特定に至れば、阻害薬投与あるいは当該遺伝子欠損マウスを用い、NASHマウスモデルにおける肝再生の促進効果などについて検討することができると考えている。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度使用額が生じたが、これは今年度予定していた、リアルタイムPCR法による遺伝子発現解析に時間がかかっており、次世代シーケンサーを利用した網羅的な解析等の実験まで至らなかったためである。次年度もNASHマウスを用いた肝再生機構の研究を行っていく予定であり、次年度使用額分の助成金については、今後の研究に必要な試薬等物品の購入での使用を予定している。
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