| 研究実績の概要 |
生活習慣の変化に伴い、国内にはNAFLD/NASHの人数は急増している。NASHの病態にはオートファジー機能異常及び小胞体ストレスが深く関連しており、異常蛋白蓄積がNASHの進展に関与している。小胞体ストレスは肝脂肪化との悪性サイクルを形成し、インスリン抵抗性をも増悪させ、さらなるNASH悪化を引き起こす事が報告されている。我々は、Mallory-Denk Body(MDB)がオートファジーの分解器質であるp62蛋白を含む凝集体であり、プロテアソームの阻害剤で再現できる事、オートファジーの亢進でMDBが減少する事を報告した（Harada M, Hepatology, 2008）。また、飽和脂肪酸が小胞体ストレスを惹起し、オートファゴソームとリソソームとの融合段階を阻害する事を報告した（Miyagawa K, Am J Pathol, 2016）。
我々はタプシガルジン、ツニカマイシン、ピュロマイシンを培養細胞であるヒト不死化肝細胞培養株(OUMS-29)及びヒト肝癌培養細胞株(Huh-7)に負荷し、小胞体ストレスが生じることを確認した。いずれも1μＭ以上の濃度、及び12時間以上の負荷でいずれの培養細胞でも確認した。また、mRFP-GFP-LC3やautophagic fluxによる検討では、タプシガルジンではオートファジーの後期段階の障害をみとめ、ツニカマイシン、ピュロマイシンではオートファジーの促進を認めた。また、小胞体ストレス誘導剤単独でのMDBの形成を認めなかった。
NAFLD/NASHには糖尿病が合併する事が多いが、糖単独での肝細胞へ与える影響は不明である。そのため、OUMS-29及びHuh-7に高濃度の糖を負荷し、濃度及び時間依存性に小胞体ストレス及び酸化ストレスが生じる事を認めた。また、高濃度の糖に小胞体ストレス誘導剤を併用したところ、小胞体ストレスの増悪を認めた。
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