アダプター分子ASCを介した血栓形成における新たな制御機構の解明と治療への応用

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K15900
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 渡邊 幸子 自治医科大学, 医学部, 助教 (80770619)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 血小板 / 血栓症 / インフラマソーム / ASC

研究実績の概要

申請者らのグループは、これまで心血管疾患の病態に共通する無菌性炎症を制御している細胞内分子複合体 NLRP3インフラマソームの重要性を明らかにしてきた。そして最近、血小板にはインフラマソーム構成分子の一つであるアダプター分子ASC のみが存在し、このASCがインフラマソームとは独立して血栓形成に寄与していることを見出し、血小板のASCに結合する候補分子を探索・同定を行ったところ、候補分子を5つ同定した。
2019年度は、ヒト巨核球細胞株（CMK11-5）およびレンチウイルスベクターを使用したASCおよび候補分子の強制発現・発現抑制（CRISPR/Cas9 システムを利用）系を構築し、活性化刺激を加えた際の細胞内シグナル・細胞内カルシウム濃度について評価を行った。その結果、ASCの発現を抑制した（ASC-KD）CMK11-5細胞ではコントロール細胞と比較して細胞内カルシウム濃度に上昇傾向が見られたものの、有意な差は認められなかった。また、細胞内シグナルについても同様に、ASC-KDとコントロールの間に有意な差は認められなかった。しかし、野生型マウスとASC KOマウスの血小板を用いた解析を行ったところ、ASC KOマウスの血小板ではトロンビンやCRP刺激による細胞内カルシウム濃度が野生型マウスと比較して有意に上昇しており、特にCRP刺激においては、その下流のP-selectinや活性型インテグリンの発現も優位に上昇し、ERKおよびAktのリン酸化も強く亢進していた。本研究の結果から、血小板においてはASCと候補分子が相互作用し、刺激による活性化を負に制御することが示唆された。今後更なる研究が期待される。

研究成果

• [雑誌論文] Glucose regulates hypoxia-induced NLRP3inflammasome activation in macrophages. (2020)
  • 著者名/発表者名: Watanabe S, Usui-Kawanishi F, Karasawa T, Kimura H, Kamata R, InoueY, Mise N, Kasahara T, Takahashi M
  • 雑誌名: Journal of Cellular Physiology 巻: － ページ: －
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Inflammasome-Independent and Atypical Processing of IL-1β Contributes to Acid Aspiration?Induced Acute Lung Injury (2019)
  • 著者名/発表者名: Mizushina Yoshiko、Karasawa Tadayoshi、Aizawa Kenichi、Kimura Hiroaki、Watanabe Sachiko、Kamata Ryo、Komada Takanori、Mato Naoko、Kasahara Tadashi、Koyama Shinichiro、Bando Masashi、Hagiwara Koichi、Takahashi Masafumi
  • 雑誌名: The Journal of Immunology 巻: 203 ページ: 236～246
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1900168
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Crucial Role of NLRP3 Inflammasome in the Development of Peritoneal Dialysis-related Peritoneal Fibrosis (2019)
  • 著者名/発表者名: Hishida Erika、Ito Homare、Komada Takanori、Karasawa Tadayoshi、Kimura Hiroaki、Watanabe Sachiko、Kamata Ryo、Aizawa Emi、Kasahara Tadashi、Morishita Yoshiyuki、Akimoto Tetsu、Nagata Daisuke、Takahashi Masafumi
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 ページ: 10363
  • DOI: 10.1038/s41598-019-46504-1
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Role of TLR5 in inflammation and tissue damage after intestinal ischemia-reperfusion injury (2019)
  • 著者名/発表者名: Ito Homare、Sadatomo Ai、Inoue Yoshiyuki、Yamada Naoya、Aizawa Emi、Hishida Erika、Kamata Ryo、Karasawa Tadayoshi、Kimura Hiroaki、Watanabe Sachiko、Komada Takanori、Horie Hisanaga、Kitayama Joji、Sata Naohiro、Takahashi Masafumi
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 519 ページ: 15～22
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2019.08.083
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 飽和脂肪酸は結晶形成を介して好中球浸潤を誘導する (2019)
  • 著者名/発表者名: 唐澤直義、渡邊幸子、笠原忠、高橋将文
  • 学会等名: 第51回日本動脈硬化学会総会・学術集会
• [備考] 自治医科大学 分子病態治療研究センター 炎症・免疫研究部
  • URL: http://www.jichi.ac.jp/inflammation/