| 研究課題/領域番号 |
18K15932
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
黒崎 史朗 自治医科大学, 医学部, 講師 (60625705)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | AAVベクター / 肺線維症 / IL-10 |
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| 研究実績の概要 |
肺線維症におけるIL-10の役割を解明するために、マウスモデルを用いて解析を行う実験を継続している。IL-10を効率よく肺に導入するために、AAVベクターにIL-10遺伝子を搭載させ、肺線維症モデルマウスの気管内に単回投与している。その後、誘導された肺線維症および治療効果を判定するために、肺切片を得、それをHE染色ならびにMasson's Trichrome染色で評価する実験を行っている。しかし、昨年度は新型コロナウイルス感染症の蔓延防止を図るため、当大学施設における動物実験は長期間制限された。そのため、今年度はこれまでに得られた肺切片を評価し（少なくとも20検体）、カメラ付き顕微鏡を用いて撮影し、線維化の程度をスコアリングすることを主に行った。これまでの結果であるが、肺線維症群に比べてIL-10を搭載したAAVベクターを投与された治療群の方が有意差をもって肺線維症の発症が抑制されていることが分かった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
上述のように新型コロナウイルス感染症の蔓延防止のために、実験施設が長期間制限されたため、動物実験を殆ど実施できなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度は動物実験を安定して行える状況であれば、肺線維症モデルマウスおよび治療群のマウスをそれぞれ20体以上作製し、生化学的解析を行う予定である。具体的には、気管支肺胞洗浄液や肺の破砕を行った抽出サンプルを得て、コラーゲンアッセイ、抗線維化に関わる因子（サイトカイン）をmRNAやELISA、ウェスタンブロットを用いて解析する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
昨年度は新型コロナウイルス感染症の蔓延防止のために、長期間動物実験が制限された。そのために、動物実験は殆ど行わず、これまでに得られた肺切片を病理学的に評価する解析を行った。そのために必要な技術補佐員の協力を得て実験を行ったが、動物実験を殆ど行わなかったため、次年度使用額が生じた。今年度は動物実験を再開する方針であり、生化学的解析を行う予定のため、試薬の確保や技術補佐員の協力を要する。
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