2018 年度実施状況報告書

各種細胞依存性強皮症モデルマウスにおける樹状細胞の形質変化に関する検討

研究課題

研究課題/領域番号	18K16069
研究機関	東京大学
研究代表者	三浦俊介東京大学, 医学部附属病院, 助教 (70803237)
研究期間 (年度)	2018-04-01 – 2020-03-31
キーワード	樹状細胞 / 線維化 / 全身性強皮症
研究実績の概要	レチノイン酸産生酵素RALDH1を産生するCD11b-CD103-分画の真皮DCが、制御性T細胞を末梢で誘導することで皮膚線維化を抑制することを明らかにした研究成果を背景に、全身性強皮症の疾病因子の一つである転写因子Fli1に着目し、loxP-Creシステムを活用して各種細胞特異的Fli1欠失マウスを作製し、強皮症の線維化の病態におけるDCと各種細胞の相互作用の役割を明らかにすることを目的に解析を進めている。今年度は各種細胞特異的li1欠失マウスの作成に成功した。Fli1 flox/floxマウスと、各種Creマウス（Cd19-Creマウス：B細胞特異的Fli1欠失マウス、LysM-Creマウス：骨髄系細胞特異的Fli1欠失マウス、Adipo-Creマウス：脂肪細胞特異的Fli1欠失マウス、K14-Creマウス：表皮細胞特異的Fli1欠失マウス）を交配し、各種細胞特異的Fli1欠失マウスを作成した。各種細胞特異的Fli1欠失マウスの作成と並行して、BLM 誘発強皮症モデルマウスの皮膚におけるRALDH1の発現量を検討した。野生型マウスとFli1欠失マウスの炎症期皮膚におけるRaldh1, Raldh2, Raldh3, Il2, Tgfb1の発現量について定量的real-time PCR法で測定した。Fli1欠失マウスではRaldh1 mRNAの発現量が有意に低下していたが、Raldh2, Raldh3, Il2, Tgfb1のmRNAの発現量については両群では差がなかった。さらに野生型マウスとFli1欠失マウスの骨髄細胞から樹状細胞を分化させ、遊走マーカーの発現量について検討した。Fli1欠失マウスの骨髄由来樹状細胞では野生型マウスの同細胞と比較して、CXCR4とCCR7の発現量が有意に亢進していた。一方、CX3CR1とCCR2の発現量については変化はなかった。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由様々な細胞特異的なFli1欠失マウスを作製して解析を進めているが、今年度は予定通り目的のマウス作成に成功した。また、その間にBLM誘発強皮症モデルマウスにおいて、DCとの相互作用を示唆する有用な所見が得られた。本年度で目的のマウスの作成が完了したため、今後詳細な解析を開始できる見込みであり、当初の計画計画と比較し、おおむね順調に進展していると言える。
今後の研究の推進方策	骨髄系細胞、B細胞、表皮細胞、脂肪細胞において特異的にFli1を欠失させたマウスについて、強皮症の線維化の病態における真皮DCと同細胞がどのように相互作用をしているのか、検討を進める。BLM誘発強皮症モデルマウスにおけるDCの遊走能への変化が確認されたため、各種細胞特異的Fli1欠失マウスについても、その相互作用が明らかになることが予想される。