| 研究課題/領域番号 |
18K16098
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
増渕 菜弥 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 博士研究員 (00791641)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 骨髄増殖性腫瘍 / Calreticulin / 分子シャペロン / サイトカイン受容体 / 翻訳後修飾 |
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| 研究実績の概要 |
フィラデルフィア染色体陰性の骨髄増殖性腫瘍（MPN）は、造血幹・前駆細胞に体細胞変異が生じ、血球の異常増加や骨髄の線維化を呈する造血器腫瘍である。MPN患者は、脳梗塞や心筋梗塞の発症リスクが高く、時に急性白血病へと病型移行する。造血幹細胞移植以外には根本的な治療法が無い上に、高齢の発症者が多いことなどから、移植適応症例は僅かであり、発症メカニズムの解明による有効な治療戦略の確立が求められている。これまでに我々は、世界に先駆けて、MPN患者の一部に共通して見出されるCalreticulin （CALR）変異遺伝子産物がトロンボポエチン受容体のMPLを恒常的に活性化し、MPNを発症させることを明らかにしている。そこで、本研究では、変異型CALRによるMPLの活性化機構を明らかにし、MPNに対する新規の治療標的分子を同定する。本年度は、CALRが本来有している分子シャペロンとしての機能に着目し、基質分子の認識の際に重要であるN型糖鎖認識能が、MPLとの結合や活性化に必要であるか検討を行った。その結果、変異型CALRは、N型糖鎖認識能の有無にかかわらず、細胞内のゴルジ体に強い発現がみられたが、N型糖鎖認識能を喪失した変異型CALRはMPLと結合せず、腫瘍原性も消失していた。これらのことから、変異型CALRは、N型糖鎖を介してMPLと結合し、細胞の腫瘍化を引き起こしていることが明らかになった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は、変異型CALRがMPLの成熟過程に付加されるN型糖鎖を認識することが、変異型CALRによるMPLとの結合や、その後の活性化に必須であることを明らかにしたことから、変異型CALRによるMPLの活性化機構の解明は、順調に進んでいると考える。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は、実際に変異型CALRが結合しているMPLに、N型糖鎖修飾が生じていることを、質量分析法などを用いて明らかにする。さらに、N型糖鎖は小胞体において付加された直後は未成熟であるが、変異型CALRが結合しているMPLにおけるN型糖鎖修飾が未成熟のものであるかについて、未成熟なN型糖鎖を切断する酵素などを用いて解析を行う。さらに、細胞内の局在の変化に伴い、MPLのN型糖鎖修飾や、変異型CALRとMPLの結合が、どのように変化するのか、解析を行う予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初予定していた研究計画のうち、変異型CALRのN型糖鎖認識によるMPLの活性化メカニズムの解析が予想外に進行し、質量分析法による解析を行わなかったため余剰が発生した。次年度、MPLのN型糖鎖修飾が生じていることを質量分析法により解析するために使用する。
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