GONAD法によるSIN3A変異乳がんモデルマウスの作成及び網羅的な標的分子探索

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K16255
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 渡邉 健司 山口大学, 大学研究推進機構, 助教 (50711264)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 乳がん / 次世代シークエンサー

研究実績の概要

ERα 陽性乳がんの治療の一つとして内分泌療法が行われるが、多くの場合耐性が認められる。耐性を打破するためには、恒常的な ERα 高発現を抑制する効果的な治療法の開発が必要である。一方、乳がんはゲノム異常の蓄積が病態に関与する。私たちは、ERα 発現を増加させる遺伝子変異の同定を試み、ERα 発現を増加させるSwitch-Independent 3 Transcription Regulator Family Member A (SIN3A)遺伝子に変異を検出した。現在、SIN3A変異体の機能をさらに詳細に検討するために、Genome-editing via Oviductal Nucleic Acids Delivery (GONAD)法を用いてSIN3A変異体を乳腺特異的に発現するノックインマウスの作成を試みている。変異体を発現するマウスを作成するための予備検討を実施した。まず操作手技を確立するため、卵子への蛍光色素の導入を試みた結果、卵子への蛍光色素導入を確認した。次に、実際に GONAD 法により、遺伝子改変マウスが作成できるか検討した。GONAD 法を行い、AKR1B7 のKO マウスを作成した。GONAD 法を用いて処置したマウスから生まれた胎児の内、13.5% が、ホモのノックアウトだった。23.1%は、AKR1B7のヘテロのノックアウトだった。25% は、複数の箇所がノックアウトされたモザイク状態であり、短期間に両アレルノックアウトマウスを作成することができた。現在、コンディショナルSIN3変異ノックインマウスを作成するために、LoxP-STOP-LoxP 配列を設計し、エレクトロポレーションを用いた導入の条件検討を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Highly concentrated trehalose induces prohealing senescence-like state in fibroblasts via CDKN1A/p21 (2023)
  • 著者名/発表者名: Muto Jun、Fukuda Shinji、Watanabe Kenji、Dai Xiuju、Tsuda Teruko、Kiyoi Takeshi、Kameda Kenji、Kawakami Ryosuke、Mori Hideki、Shiraishi Ken、Murakami Masamoto、Imamura Takeshi、Higashiyama Shigeki、Fujisawa Yasuhiro、Mizukami Yoichi、Sayama Koji
  • 雑誌名: Communications Biology 巻: 6 ページ: 13-13
  • DOI: 10.1038/s42003-022-04408-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autocrine TNF-α Increases Penetration of Myelin-Associated Glycoprotein Antibodies Across the Blood-Nerve Barrier in Anti-MAG Neuropathy (2023)
  • 著者名/発表者名: Sato Ryota、Shimizu Fumitaka、Kuwahara Motoi、Mizukami Yoichi、Watanabe Kenji、Maeda Toshihiko、Sano Yasuteru、Takeshita Yukio、Koga Michiaki、Kusunoki Susumu、Kanda Takashi
  • 雑誌名: Neurology - Neuroimmunology Neuroinflammation 巻: 10 ページ: e200086～e200086
  • DOI: 10.1212/NXI.0000000000200086
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jo-1 Antibodies From Myositis Induce Complement-Dependent Cytotoxicity and TREM-1 Upregulation in Muscle Endothelial Cells (2023)
  • 著者名/発表者名: Honda Masaya、Shimizu Fumitaka、Sato Ryota、Mizukami Yoichi、Watanabe Kenji、Takeshita Yukio、Maeda Toshihiko、Koga Michiaki、Kanda Takashi
  • 雑誌名: Neurology - Neuroimmunology Neuroinflammation 巻: 10 ページ: e200116～e200116
  • DOI: 10.1212/NXI.0000000000200116
  • 査読あり
• [雑誌論文] An elemental diet protects mouse salivary glands from 5-fluorouracil-induced atrophy (2022)
  • 著者名/発表者名: Harada Koji、Ferdous Tarannum、Fujiwara Rieko、Watanabe Kenji、Mizukami Yoichi、Mishima Katsuaki
  • 雑誌名: Oncology Letters 巻: 23 ページ: 178-178
  • DOI: 10.3892/ol.2022.13298
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-inflammatory effects of differential molecular weight Hyaluronic acids on UVB-induced calprotectin-mediated keratinocyte inflammation (2022)
  • 著者名/発表者名: Hu Liuying、Nomura Satoshi、Sato Yasunari、Takagi Kyoko、Ishii Tsuyoshi、Honma Yoichi、Watanabe Kenji、Mizukami Yoichi、Muto Jun
  • 雑誌名: Journal of Dermatological Science 巻: 107 ページ: 24～31
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2022.06.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Age-associated changes in gene expression in the anterior pituitary glands of female Japanese black cattle (2022)
  • 著者名/発表者名: Abdillah Dimas Arya、Kereilwe Onalenna、Mizukami Yoichi、Watanabe Kenji、Kadokawa Hiroya
  • 雑誌名: Mammalian Genome 巻: 33 ページ: 606～618
  • DOI: 10.1007/s00335-022-09958-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] The effect of 5-aminolevulinic acid on canine peripheral blood mononuclear cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Igase Masaya、Iwatani Nao、Sakai Aki、Watanabe Kenji、Mizukami Yoichi、Mizuno Takuya
  • 雑誌名: Veterinary Immunology and Immunopathology 巻: 251 ページ: 110473～110473
  • DOI: 10.1016/j.vetimm.2022.110473
  • 査読あり
• [学会発表] 乳癌患者から検出したミトコンドリアDNAの体細胞変異は代謝パスウェイを活性化する (2022)
  • 著者名/発表者名: 渡邉 健司、山本 滋、前田 訓子、西村 愛代、諌山 慧士朗、岡 正朗、永野浩昭、水上 洋一
  • 学会等名: 第45回分子生物学会
• [学会発表] ネギの葉色に関する遺伝分析 (2022)
  • 著者名/発表者名: 中島徹也, 中田怜奈, 下見悠輔, 藤井宏栄, 妻鹿良亮, 渡邉健司, 水上洋一, 平川英樹, 佐藤修正, 執行正義
  • 学会等名: 第14回中国地域育種談話会