| 研究課題/領域番号 |
18K16267
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
井廻 良美 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教 (20649040)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | DYRK2 / 乳癌 / CDK14 |
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| 研究実績の概要 |
DYRK2はリン酸化酵素であり、DYRK2の発現が低い乳癌では細胞増殖能、浸潤能が高く、悪性度も高くなっている。そこで、本研究ではDYRK2の発現の低い乳癌で、治療効果の高い薬剤があるかを調べるため、マイクロアレイを用いて、DYRK2によって制御を受ける下流の遺伝子を網羅的に探索し、乳癌細胞株を用いた生化学的解析により、その発現制御機構を明らかにすることを目標にかかげている。
これまでの研究から、マイクロアレイを用いて、DYRK2によって制御を受ける遺伝子を網羅的に探索した結果、代表的なヒト乳癌細胞株であるMCF-7では、DYRK2の発現を抑制すると、Cyclin-dependent kinase 14 (CDK14) の転写が増加することが判明している。
平成30年度は、DYRK2によるCDK14の発現制御機構に焦点をあてた解析を行った。CDK14は直接DYRK2に転写制御されていると考えられ、レポーターアッセイ・転写因子の結合部位解析を用いて、転写因子の同定を目指した。その結果、Androgen receptor (AR)が転写因子として同定された。
平成31年度は、DYRK2の発現量と抗癌剤等の各種薬剤の治療効果の相関に焦点をあてた解析を行った。DYRK2の発現が低い乳癌細胞株(MDA-MB-231細胞など)、高い乳癌細胞株(MCF-7細胞など)、DYRK2を発現抑制した乳癌細胞株に抗癌剤・CDK14阻害薬・前年度に同定した転写因子ARの阻害薬などを作用させ、MTSアッセイを用いて、腫瘍細胞増殖能や各種薬剤耐性の変化を測定した。
令和2年度は、平成31年度と同様にDYRK2の発現量の異なる乳癌細胞株に、各種薬剤を作用させ、MTSアッセイを用いて、腫瘍細胞増殖能や各種薬剤耐性の変化を測定し、DYRK2の発現が低い乳癌に対して治療効果が期待出来る化合物を探索した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
令和2年度は、DYRK2の欠失がどのように腫瘍の増殖・浸潤に寄与しているかを明らかにする為に、実際の乳癌患者の癌組織を用いた病理学的解析を行う予定であったが、平成31年度から引き続きDYRK2の発現量と抗癌剤等の各種薬剤の治療効果の相関に焦点をあてた解析を行った。MTSアッセイを用いて、腫瘍細胞増殖能や各種薬剤耐性の変化を測定し、DYRK2の発現が低い乳癌に対して治療効果が期待出来る化合物を探索するのみとなった。
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| 今後の研究の推進方策 |
DYRK2の発現量と抗癌剤等の各種薬剤の治療効果の相関を検討する。 DYRK2を発現抑制した乳癌細胞株と過剰発現させた乳癌細胞株に抗癌剤・CDK14阻害薬・平成30年度に同定した転写因子ARの阻害薬などを作用させ、DYRK2の発現の低い乳癌でむしろ治療効果が高いか、腫瘍細胞増殖能や各種薬剤耐性の変化をin vitroでのMTSアッセイや、マウスを用いた腫瘍形成能判定などのin vivoで判定する。更に、DYRK2の欠失がどのように腫瘍の増殖・浸潤に寄与しているかを明らかにする為に、実際の乳癌患者の癌組織を用いた病理学的解析を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
令和2年度の計画では、DYRK2の欠失がどのように腫瘍の増殖・浸潤に寄与しているかを明らかにする為に、実際の乳癌患者の癌組織を用いた病理学的解析を行う計画であったが、令和2年度は引き続きDYRK2の発現量と抗癌剤等の各種薬剤の治療効果の相関に焦点をあてたin vitroでの解析のみとなった為。令和3年度は、マウスを用いた腫瘍形成能判定などのin vivoでも判定する予定である。更に、実際の乳癌患者の癌組織を用いた病理学的解析を行う予定である。
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