改良型プロテオーム解析を用いた、乳癌ホルモン耐性機序の解明

2020 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K16270
• 研究機関: 大阪医科大学
• 研究代表者: 藤岡 大也 大阪医科大学, 医学部, 非常勤講師 (50773719)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 乳癌 / 薬剤耐性 / パクリタキセル

研究実績の概要

進行再発乳癌は、ホルモン療法を含めた各種抗癌剤、放射線療法などの集学的治療を用いても依然として予後不良である。このため進行再発乳癌治療において如何にホルモン療法を行うかが重要である。
本研究では、乳癌のホルモン療法の耐性獲得機序解明のために、ホルモン耐性株・非耐性株を使用してホルモン耐性機序をタンパク質発現変化から解明する。
前実験としてホルモン剤であるタモキシフェン耐性乳癌細胞株を樹立している。このタモキシフェン耐性乳癌細胞株と非耐性株（親株）からタンパクを抽出し、それらを使用して構造と機能を対象とするプロテオーム解析を行った。解析の結果、いくつかの候補タンパク質が同定された。その一つであるStathminは微小管の脱重合を促進するリン酸化タンパク質である。そのタンパク質発現の検証にウエスタンブロットや耐性株に標的とする遺伝子を導入し、タモキシフェン耐性株のタモキシフェンが解除されるかを薬剤感受性試験などで検証を行ったが、耐性株の状況が思わしくなく、安定性に欠ける結果となった。
そして、プロテオーム解析の機器故障で計画していた実験の遂行が困難な状況に陥った為、予定していた計画を変更すべきと判断した。
細胞に関しては、安定したタモキシフェン耐性の細胞株を購入した。プロテオーム解析は外注する計画である。

現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

細胞の状態や腫瘍に用いる実験系の機器の故障及びタモキシフェン耐性株の輸入にかなりの時間がかかった為。

今後の研究の推進方策

購入した乳癌タモキシフェン耐性株を使用し、外注にてプロテオーム解析を行い、同定されたタンパク質機能解析を進める計画である。

次年度使用額が生じた理由

耐性株購入に計画していたよりも時間を要し、研究に遅れが生じたので、期間延長を行い、研究費を次年度にしようすることとした。
次年度は購入した細胞株を使用して、外注によるプロテオーム解析を行うため、次年度使用額はそれらの費用に充てる予定である。