研究課題/領域番号 |
18K16908
|
研究機関 | 東邦大学 |
研究代表者 |
穐山 直太郎 東邦大学, 医学部, 講師 (90554238)
|
研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
|
キーワード | 癌生存シグナル / 外耳道扁平上皮癌 / EGF / PDK1 / エレクトロポレーション |
研究実績の概要 |
epidermal growth factor receptor (EGFR)は外耳道扁平上皮癌の増大・浸潤に強く関わることが示唆されており、EGFRのエフェクター分子の一つであるphosphoinositide-dependent protein kinase-1 (PDPK1)は頭頸部扁平上皮癌など多くの癌で抗アポトーシス作用による癌生存シグナルとの関連性が示唆されており、新規治療標的として着目されている。外耳道EGF過剰発現マウスモデルを用いてEGFR/PDPK1シグナル阻害効果を検討した。 6週齢、雄のBALB/cマウスを用い、EGF発現ベクター(pCMV-hEGF-Flag)を外耳道にエレクトロポレーション法で導入し、外耳道EGF過剰発現マウスモデルを作製した。EGF発現ベクター導入群では内視鏡観察により外耳道の隆起性病が認められ、Flag染色によりマウス外耳道へのベクター導入が確認された。免疫組織学的解析では外耳道上皮におけるEGF、EGFR、PDPK1の発現上昇を認め、 細胞殖性マーカーのKi67陽性細胞率の上昇を認めた。 次に、本モデルを用い、PDK1阻害剤の腹腔内投与によるEGFR/PDPK1シグナルの阻害実験を行った。結果、PDPK1阻害剤投与群でEGF、EGFR、PDPK1、Ki67陽性率がすべて低下した。アポトーシス解析をcleaved caspase-3の免疫組織化学、terminal deoxy(d)-UTP nick end labeling (TUNEL)法により行ったところ、cleaved caspase-3陽性率およびTUNEL陽性率は上昇した。以上の結果から外耳道扁平上皮癌におけるEGFR/PDPK1シグナルの重要な役割を果たしており、EGFR/PDPK1シグナル阻害によりアポトーシスが誘導され抗腫瘍効果を発揮する可能性が示唆された。
|
現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
COVID19感染拡大に伴い研究環境および人員に制約が加わったため、解析にやや遅れを生じた。しかしながら、解析結果は着実に得られており、研究内容自体はの予定通り着実に進行しており、特に問題はない。
|
今後の研究の推進方策 |
2022年10月開催予定の第32回日本耳科学会総会・学術講演会に向けて本研究の総括を行い、発表予定である。
|
次年度使用額が生じた理由 |
予定していたタンパク阻害実験が行えなかったため、未使用額が生じた。次年度は試薬の購入、成果発表のための学術集会参加費用、論文作成・掲載費用に使用する予定である。
|