| 研究課題/領域番号 |
18K16946
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
木村 麗子 (山岸麗子) 東京大学, 医学部附属病院, 特任研究員 (80704642)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | TRPV4 / Piezo1 / 眼圧 / 緑内障 |
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| 研究実績の概要 |
初代ヒト線維柱帯細胞（HTM)を用いて、mRNA発現量をreal -time PCR法にて比較した。その結果、PIEZO1が最も高く、続いてTRPV2, TRPV4, TRPV6の順にmRNA発現量が高いことが明らにした。
また、PIEZO1およびTRPV4についてHTMへsiRNA処理をし、real-time PCR法にて発現量を検討した結果、30-40%程度までmRNAレベルが有意に低下していることがわかった。HTMにおいてPIEZO1およびTRPV4遺伝子をKnock down（KD)させることに成功した。
続いて上記のHTMに対し、TRPV4およびPiezo1 agonistによる[Ca2+]i上昇について検討した結果、TRPV4およびPiezo1 agonistによる細胞内[Ca2+]上昇は、siRNA処理によって有意に減少していた。つまりsiRNA処理により、機能的にもKDさせることに成功した。ここで得られたKD処理済みのHTMを用いて、伸展刺激に対する作用について検討した結果、30%伸展刺激をKD済みのHTMに与えると、Piezo1 siRNA処理をした場合には[Ca2+]i上昇が抑制されている傾向にあり、TRPV4 siRNA処理をした場合には、normalと差は認められなかった。つまり、伸展刺激にはPIEZO1を介する細胞内[Ca2+]上昇が起こる可能性が示唆された。
そしてTRPV4 KOマウスの眼圧測定をマイクロニードル法により測定した結果、TRPV4 KOマウスは野生型マウスと比較し、通常状態でベース眼圧が上昇していた。また野生型マウスにTRPV4 agonistを投与した場合、眼圧が低値を示していた。
このことから、TRPV4はマウスにおいて眼圧調節に関与する可能性が示唆され、そのagonistは緑内障治療薬の候補として有用であると考えられる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
産前産後の研究中断期間があったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は、人工的にマウス眼に対して圧力負荷をかけたときに、TRPV4およびPiezo1の発現が遺伝子レベル、もしくは蛋白レベルで変化するかどうかを確認する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究中断期間を設けたため、使用額の変更が生じた。そのため、研究進捗も遅れているため、その分の研究を本年度以降に行う予定である。
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