| 研究課題/領域番号 |
18K17233
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| 研究機関 | 横浜市立大学 |
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研究代表者 |
大久保 牧子 横浜市立大学, 医学研究科, 客員研究員 (10780611)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 口腔癌オルガノイド / M2マクロファージ |
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| 研究実績の概要 |
口腔癌において治療後再発の制御は予後の改善のために重要で、申請者はこれまでに治療により腫瘍内へ誘導されたCD11bを発現する骨髄細胞がM2マクロファージ（M2Mφs）へ分化し，再発に貢献することを見出した．M2Mφsは培養系では血管新生などの様々な腫瘍促進性を有することが報告され，治療の標的として注目されているが，複雑ながん微小環境におけるM2Mφsの役割や作用機序には不明な点が多い．特に再発に関わる役割はほとんど分かっていない．そこで本研究ではがん本来の微小環境を再現する目的で、がんオルガノイド培養の確立を試み，その中で口腔癌再発に関わるM2Mφsの多様な役割の解明を目的とした．まず初年度としてヒト口腔扁平上皮癌細胞株のOSC-19細胞と，生検や手術で得たPatient-derived cell （PD cell）による2種類の口腔癌オルガノイドの作製を行った。まずはOSC-19細胞株を用いてオルガノイドの作製を試みるため、OSC-19細胞に血管内皮細胞，間質系幹細胞を添加した懸濁液を専用の小型ディンプルプレートで三次元培養を行った．詳細な条件検討を行い培養方法を確立した後，細胞増殖，血管新生，薬剤耐性（シスプラチン，ドセタキセル，セツキシマブなど），放射線感受性などを検討した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
現在までに口腔がんオルガノイドの作成方法を確立しており、現在は臨床情報をトレースできるかどうかの解析を行っている。
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| 今後の研究の推進方策 |
オルガノイドの作製方法を確立できたため、今後は様々な微小環境構成成分を添加して数種類のアッセイ系にて解析を推進していく予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は以前用意した試薬や用具を用いることができたため次年度使用額が生じた。次年度はマクロファージの機能解析のためにより多くのアッセイ（細胞増殖，ファゴサイトーシス，薬剤耐性，血管新生など）を計画しているため様々な専用キットや試薬の購入をが必要となる。さらにイメージングのための蛍光試薬や、免疫原生の低いNOGマウスの購入にも助成金を使用する予定である。．
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