| 研究課題/領域番号 |
18K19269
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
浅野 雅秀 京都大学, 医学研究科, 教授 (50251450)
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| 研究分担者 |
成瀬 智恵 京都大学, 医学研究科, 准教授 (30372486)
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| 研究期間 (年度) |
2018-06-29 – 2021-03-31
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| キーワード | デグロン / PD-1 / マウス |
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| 研究実績の概要 |
現在のPD-1抗体を用いたがん免疫療法は，PD-1抗体投与により，がん細胞のみならず正常細胞をも傷害してしまい，自己免疫疾患を発症する例があることや，再発時に患者に負担がかかることがある。そこで本研究では免疫細胞上のPD-1を時期特異的に分解できるようなシステム，すなわちデグロンシステムを用いた新規がん治療システムを，マウスモデルを用いて構築しようとしている。今年度は，昨年度までに作製した，PD1-mCherry-デグロンタグ融合タンパク質を発現するホモ接合マウスを用いて，がん細胞が排除できるかどうかを調べた。野生型マウスおよびホモ接合マウスにアデノカルシノーマ由来がん細胞を移植し，増殖率を調べたところ，PD1-mCherry-デグロンタグ融合タンパク質を除去する薬剤を投与した時には，後者でのみがん細胞の増殖が抑制された。薬剤を投与しない時には，野生型と同様の増殖が見られた。薬剤を投与したホモ接合マウスのがん細胞周辺におけるPD-1の発現量は，野生型よりも減少していた。しかしながら，薬剤を投与しないホモ接合マウスにおいても減少していたので，デグロンシステムの漏れがあると考えられ，今後，漏れの少ないシステムを検討する予定である。また，薬剤を投与してがんが縮小したマウスにおいては樹状細胞の割合が増加しており，これまでにPD-1抑制によってがんが縮小する時と同様のメカニズムでがんが縮小していることが予想された。PD-1欠損マウスでは自己免疫疾患を発症することが報告されているが，本研究に用いているホモ接合体は１年以上経過しても自己免疫疾患の発症が認められず，体重，体長，生殖能力など，野生型と違いがなかったので，デグロンシステムを導入することによる健康被害は少ないと考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ホモ接合マウスを用いて，in vivoにおける細胞傷害活性を調べることができた。また，ホモ接合マウスの健康状態にも異常はないため，生体におけるデグロンシステムの毒性は低いのではないかと考えられた。
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| 今後の研究の推進方策 |
デグロンシステムの漏れがあると考えられ，今後，漏れの少ないシステムを検討する予定である。原因として，デグロンタグの切除が完全にできていないことが予想される。そのため，培養細胞を用いて，PD-1-デグロン融合タンパク質の発現が，薬剤によってよりシャープに制御できるコンストラクションを検討する。具体的には，蛍光タンパク，および，リンカーの種類や長さを変更することで，デグロンタグが完全に切除できるようなコンストラクションを検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
2019年度はPD1-mCherry-デグロンタグ融合タンパク質を発現するホモ接合マウスを用いてがん細胞の増殖抑制実験を行ったので、予定通りの予算執行であったが、2018年度の未使用分を次年度に繰り越した。2020年度は改良型のマウスを作製するとともに、骨髄移植の実験も行うので、残りの予算を執行する予定である。
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