現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
5つの発生ステージ (HH27, 29, 31, 34, 38) における雌雄の生殖腺において、7種類の性分化関連遺伝子 (DMRT1, SOX9, AMH, HEMGN, FOXL2, CYP19A1, NR5A1) の発現様式を確認し、性決定時期をHH26以前であることを推定した。さらに、性決定直後のHH26-28胚と、性分化が進行したHH30-32胚の生殖腺を雌雄ごとにサンプリングし、RNAを抽出してRNA-seq解析を行った。得られた転写産物のうち、ZW型のメスのみで発現しており、さらに性決定直後のHH-26-28胚に転写量が多いものを、情報解析により選定した。その結果、74種類の転写産物を得た。このうち、タンパク質をコードした遺伝子を24種類、ncRNAを8種類確認した。さらに、このうち少なくとも4種類のncRNA配列とは4種類のタンパク質をコードした遺伝子は、W染色体上に存在することを確認した。そこで、4種類のncRNAの配列を決定し、発現解析を行った。また4種類のタンパク質をコードした遺伝子については、ZアレルとWアレルをもつため、それぞれの遺伝子について両アレルの配列を決定し、発現解析を行った。また、1種類の遺伝子について、CRIPR/Cas9の系を用いたノックアウトを行った。
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