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2018 年度 実施状況報告書

がん抑制遺伝子HNF-4αの再活性化による肝がん分化誘導療法の研究

研究課題

研究課題/領域番号 18K19538
研究機関金沢大学

研究代表者

山下 太郎  金沢大学, 附属病院, 准教授 (90377432)

研究期間 (年度) 2018-06-29 – 2020-03-31
キーワード肝細胞分化
研究実績の概要

2018年度にはHNF-4α活性化リガンドの探索を行うため、HNF-4α 結合により活性化されるルシフェラーゼリポーター細胞の安定細胞株を樹立した。また、HNF-4αの活性化後プロテアソーム分解を評価できるpCMV6-HNF-4α-GFP細胞を作成した。ただし、この細胞は安定株の作成には至らず、トランジエントトランスフェクションによる評価系となった。また、脂質代謝ライブラリーを購入し、96ウェルプレートでのHNF-4α活性化評価システムの構築を行った。
さらに、ヒト肝細胞がんマイクロアレイデータを用いてHNF-4α-highと-lowの肝細胞がんに分類し、BRB-array toolを用いてclass-comparison解析を行い、HNF-4α-highと-lowの各classで発現が亢進している遺伝子クラスターを抽出した。抽出した遺伝子群についてはMetaCoreソフトウェアを用いてパスウェイ解析を施行、糖代謝、脂質代謝、薬物代謝に関わる遺伝子群がHNF-4α-highの肝細胞がんで活性化していた。一方、Wntシグナル伝達に関わる遺伝子群やFOXM1により制御される遺伝子群がHNF-4α-lowの肝細胞がんで活性化していた。
また、2018年度にはヒト肝細胞がん細胞株を用いてHNF-4α遺伝子発現を抑制するシグナル伝達系について、HNF-4αP1遺伝子プロモーターをluciferaseの上流に組み込んだplasmidを発現するレポーター細胞を作成した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

レポーター細胞、マイクロアレイ解析、パスウェイ解析、HNF4Aプロモーター解析のためのリポーター細胞など、当初予定していた実験計画に沿って順調に研究は進んでいるため。

今後の研究の推進方策

2019年度にはリポーター細胞を用いたHNF4Aの転写活性を制御しうるリガンドの探索、HNF4Aのプロモーター領域を制御しHNF4A遺伝子発現を再活性化する薬剤のスクリーニングを行う。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2018

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (1件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] The osteopontin-CD44 axis in hepatic cancer stem cells regulates IFN signaling and HCV replication.2018

    • 著者名/発表者名
      1.Shirasaki T, Honda M, Yamashita T, Nio K, Shimakami T, Shimizu R, et al.
    • 雑誌名

      Scientific reports.

      巻: 8 ページ: 2222-33

    • DOI

      10.1038/s41598-018-31421-6.

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 1.Dickkopf-1 is a new molecular target for the treatment of hepatocellular carcinoma2018

    • 著者名/発表者名
      Tsuyoshi Suda, Taro Yamashita, Shuichi Kaneko,
    • 学会等名
      AASLD Annual Meeting
    • 国際学会

URL: 

公開日: 2019-12-27  

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