研究課題/領域番号 |
18K19860
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研究機関 | 国立研究開発法人国立環境研究所 |
研究代表者 |
野原 恵子 国立研究開発法人国立環境研究所, 環境リスク・健康研究センター, フェロー (50160271)
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研究分担者 |
中林 一彦 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 周産期病態研究部, 室長 (10415557)
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研究期間 (年度) |
2018-06-29 – 2021-03-31
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キーワード | 次世代影響 / 無機ヒ素 / リプログラミング / DNAメチル化 / 胚 / 精子 / 妊娠期曝露 |
研究実績の概要 |
申請者らは妊娠マウス(F0)に無機ヒ素を曝露すると、その雄の子(F1)を親とする次の世代(F2)の肝臓で腫瘍が増加することを発見した。そこでヒ素群F1精子におけるDNAメチル化修飾のかく乱がF2に受け継がれ肝腫瘍増加に関与すると仮定した。しかし生殖細胞のDNAメチル化は受精後に一旦ほぼ脱メチル化され初期化された後に再構成されることから、受精前のDNAメチル化かく乱が受精後の胚でどの程度、どのように再構成されるかは全く不明である。この点を明らかにするために、本研究では精子における環境由来のDNAメチル化かく乱の次世代胚への伝搬について検討することを目的とした。 C3Hマウスの妊娠期に通常の水(対照群)または無機ヒ素を含む水(ヒ素群)を投与して仔世代(F1)の雄を得、対照群F1、ヒ素群F1雄それぞれを他系統(C57BL/6)の雌マウスと交配し、妊娠7.5日目に胎盤より胚を採取した。各群の胚からDNAを単離し、Reduced representation bisulfite sequencing (RRBS)用ライブラリーを作製し、次世代シークエンスを開始した。 またC3Hマウス対照群およびヒ素群F1精子DNAのRRBS解析を行い、詳細なデータ解析を行った。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
C3Hマウス対照群および妊娠期ヒ素曝露群のF1雄とC57BL/6マウスの雌を交配し、7.5日胚を採取し、DNAを調製することに成功し、計画が予定通り進行した。
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今後の研究の推進方策 |
C3Hマウス対照群およびヒ素群F1雄とC57BL/6マウス雌を交配して得た7.5日胚のRRBSライブラリーの次世代シークエンスを完了する。アレル別のDNAメチル化解析を実施することによって父親と母親由来のDNAメチル化パターンを明らかにし、ヒ素曝露によるF1精子でのDNAメチル化変化が次世代の胚にいかに伝わるかを明らかにする。 さらにヒ素群の胚で検出されたDNAメチル化かく乱領域について、各種データベース等を利用することによって腫瘍との関連を考察する。
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