ゼノフリー型セルフフィーダーシステムによるiPS細胞由来血小板製剤の臨床応用実現

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K19910
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 田村 彰吾 名古屋大学, 医学系研究科(保健), 講師 (60722626)
• 研究分担者: 小嶋 哲人 名古屋大学, 医学系研究科(保健), 教授 (40161913) [辞退] ; 佐々木 知幸 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (40739124)
• 研究期間 (年度): 2018-06-29 – 2020-03-31
• キーワード: 巨核球 / 骨髄微小環境

研究実績の概要

これまで巨核球分化・成熟を支持する骨髄間質細胞の報告はほとんどなく、血小板・巨核球造血に対する骨髄環境の研究は未開拓の分野であった。我々はpodoplanin (PDPN) 陽性間葉系細胞の発見から『骨髄内微小環境が血小板・巨核球造血を制御する』という新しい概念を提唱し、従来の血小板・巨核球造血研究にブレークスルーをもたらした（Tamura S et al. Blood. 2016.127(13):1701-10）。PDPN陽性間葉系細胞はPDPNを介して巨核球のC-type lectin-like receptor 2（CLEC-2）を刺激し、幼若巨核球の自己増殖を増強する。この知見から、申請者らはポドプラニン陽性間葉系細胞が巨核球分化誘導性フィーダー細胞として応用可能であると考えた。
PDPN陽性間葉系細胞の巨核球培養フィーダーとしての可能性を検討するために、我々は不死化PDPN陽性間葉系細胞を樹立した。マウス培養巨核球との共培養でPDPN陽性間葉系細胞の巨核球造血促進能を評価したところ、ゲノム編集により作製したPDPN KO間葉系細胞に比して、PDPN陽性間葉系細胞は明らかに巨核球前駆細胞の自己増殖を促進することを確認した。これは培養下においてもPDPNが巨核球の増殖を促進することを示す。しかし、成熟巨核球から産生される血小板がフィーダーであるPDPN陽性間葉系細胞に接着してしまい、血小板の回収率が極端に低下することも明らかになった。
今後は、リコンビナントPDPNを固着させたマイクロビーズなどの非細胞系巨核球造血支持担体など、非フィーダー細胞の血小板大量産生培養システムの開発が必要である。

研究成果

• [雑誌論文] Higher FVIII:C measured by chromogenic substrate assay than by one-stage assay is associated with silent hemophilic arthropathy (2020)
  • 著者名/発表者名: Ogawa Mika、Suzuki Nobuaki、Takahashi Nobunori、Tamura Shogo、Suzuki Atsuo、Suzuki Sachiko、Hattori Yuua、Kakihara Misaki、Kanematsu Takeshi、Kojima Toshihisa、Katsumi Akira、Hayakawa Fumihiko、Kojima Tetsuhito、Ishiguro Naoki、Kiyoi Hitoshi、Matsushita Tadashi
  • 雑誌名: Thrombosis Research 巻: 188 ページ: 103～105
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2020.01.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Soluble CLEC-2 is generated independently of ADAM10 and is increased in plasma in acute coronary syndrome: comparison with soluble GPVI (2019)
  • 著者名/発表者名: Inoue Osamu、Osada Makoto、Nakamura Junya、Kazama Fuminori、Shirai Toshiaki、Tsukiji Nagaharu、Sasaki Tomoyuki、Yokomichi Hiroshi、Dohi Tomotaka、Kaneko Makoto、Kurano Makoto、Oosawa Mitsuru、Tamura Shogo、Satoh Kaneo、Takano Katsuhiro、Miyauchi Katsumi、Daida Hiroyuki、Yatomi Yutaka、Ozaki Yukio、Suzuki-Inoue Katsue
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 110 ページ: 285～294
  • DOI: https://doi.org/10.1007/s12185-019-02680-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular basis of SERPINC1 mutations in Japanese patients with antithrombin deficiency (2019)
  • 著者名/発表者名: Tamura Shogo、Hashimoto Erika、Suzuki Nobuaki、Kakihara Misaki、Odaira Koya、Hattori Yuna、Tokoro Mahiru、Suzuki Sachiko、Takagi Akira、Katsumi Akira、Hayakawa Fumihiko、Suzuki Atsuo、Okamoto Shuichi、Kanematsu Takeshi、Matsushita Tadashi、Kojima Tetsuhito
  • 雑誌名: Thrombosis Research 巻: 178 ページ: 159～170
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2019.04.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Apparent synonymous mutation F9 c.87A>G causes secretion failure by in-frame mutation with aberrant splicing (2019)
  • 著者名/発表者名: Odaira Koya、Tamura Shogo、Suzuki Nobuaki、Kakihara Misaki、Hattori Yuna、Tokoro Mahiru、Suzuki Sachiko、Takagi Akira、Katsumi Akira、Hayakawa Fumihiko、Okamoto Shuichi、Suzuki Atsuo、Kanematsu Takeshi、Matsushita Tadashi、Kojima Tetsuhito
  • 雑誌名: Thrombosis Research 巻: 179 ページ: 95～103
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2019.04.022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful Perioperative Combination of High-Dose FVIII Therapy Followed by Emicizumab in a Patient with Hemophilia A with Inhibitors (2019)
  • 著者名/発表者名: Okamoto Shuichi、Suzuki Nobuaki、Suzuki Atsuo、Suzuki Sachiko、Tamura Shogo、Suzuki Mochihito、Takahashi Nobunori、Kojima Toshihisa、Kanematsu Takeshi、Kojima Tetsuhito、Kiyoi Hitoshi、Ishiguro Naoki、Matsushita Tadashi
  • 雑誌名: TH Open 巻: 03 ページ: e364～e366
  • DOI: 10.1055/s-0039-3401001
  • 査読あり
• [学会発表] 先天性凝固異常症の遺伝子解析 「解析のStrategyとPitfall」 (2019)
  • 著者名/発表者名: 田村彰吾、高木明、早川文彦、小嶋哲人
  • 学会等名: 第20回日本検査血液学会学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] プロトロンビン R593L マウスの作製と解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 伸明，鈴木 敦夫，鈴木 幸子，田村 彰吾，高木 明， 小嶋 哲人，松下 正
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 血小板・巨核球上の C 型レクチン様受容体(CLEC-2)が，赤血球造血に及ぼす役割 (2019)
  • 著者名/発表者名: 大竹 志門，白井 俊光，築地 長治，佐々木知幸，田村 彰吾， 尾崎由基男，井上 克枝
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] int1h-1 を介した組換えではあるが Inv1 ではなく F8 イントロン 1 での複雑な大規模欠 失挿入変異による重症血友病 A (2019)
  • 著者名/発表者名: 所 真昼，田村 彰吾，鈴木 伸明，垣原美紗樹，服部 有那， 大平 晃也，鈴木 幸子，高木 明，早川 文彦，岡本 修一，兼松 毅， 松下 正，小嶋 哲人
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] F9 サイレント変異 c.87A ＞ G(p.Thr29 =)に起因するスプライシング異常の分子病態解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 大平 晃也，田村 彰吾，所 真昼，垣原美紗樹，服部 有那， 鈴木 幸子，高木 明，早川 文彦，岡本 修一，兼松 毅，鈴木 伸明， 松下 正，小嶋 哲人
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 新規伸長型変異を認めた先天性血液凝固第 XI 因子欠乏症の 1 例 (2019)
  • 著者名/発表者名: 早川 友梨，田村 彰吾，鈴木 伸明，大平 晃也，垣原美紗樹， 服部 有那，所 真昼，河島 史華，鈴木 幸子，早川 文彦，高木 明， 岡本 修一，兼松 毅，松下 正，小嶋 哲人
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 産科関連静脈血栓症における血栓性素因検索 -名古屋大学医学部附属病院における症例 第 2 報- (2019)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 幸子，垣原美紗樹，服部 有那，大平 晃也，所 真昼， 河島 史華，早川 友梨，岡本 修一，兼松 毅，中野 知子，今井 健史， 牛田 貴文，森山 佳則，小谷 友美，鈴木 伸明，田村 彰吾，早川 文彦， 小嶋 哲人，松下 正
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 特発性血小板減少性紫斑病の病勢に対し，サイトメガロウイルス再活性化の関与が疑わ れた 2 例 (2019)
  • 著者名/発表者名: 兼松 毅，鈴木 伸明，岡本 修一，鈴木 敦夫，川上 萌， 三田 直美，田村 彰吾，小嶋 哲人，清井 仁，松下 正
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] A Complex F8 Rearrangement Associated with Template Switching and int1h-related Homologous Recombination in a Patient with Severe Hemophilia A (2019)
  • 著者名/発表者名: M. Tokoro, S. Tamura, N. Suzuki, M. Kakihara, Y. Hattori, K. Odaira, S. Suzuki, A. Takagi, F. Hayakawa, S. Okamoto, T. Kanematsu, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [学会発表] F9 c.87A>G is a Double-faced Deleterious Mutation which Causes a Synonymous and Inframed-mutant FIX due to an Aberrant mRNA Splicing (2019)
  • 著者名/発表者名: K. Odaira, S. Tamura, N. Suzuki, M. Kakihara, Y. Hattori, M. Tokoro, S. Suzuki, A. Takagi, A. Katsumi, F. Hayakawa, S. Okamoto, A. Suzuki, T. Kanematsu, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [学会発表] An Inv22-like F8 Inverted Disruption in Severe Hemophilia a Brothers Possibly Occurring from Template Switching between Sister Chromatids (2019)
  • 著者名/発表者名: M. Kakihara, S. Tamura, M. Tokoro, K. Odaira, Y. Hattori, S. Suzuki, F. Hayakawa, M. Ogawa, T. Kanematsu, N. Suzuki, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [学会発表] Genetic Abnormalities of Japanese Patient with Symptomatic- and Asymptomatic-dysfibrinogenemia (2019)
  • 著者名/発表者名: Y. Hattori, S. Tamura, N. Suzuki, M. Kakihara, S. Suzuki, K. Odaira, M. Tokoro, F. Hayakawa, S. Okamoto, T. Kanematsu, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [備考] 名古屋大学大学院医学系研究科 総合保健学専攻 オミックス医療科学分野 造血・凝固チーム
  • URL: https://bloodgene-coag-hematopoiesis.jimdofree.com/