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2023 年度 実績報告書

3次元分子配向観察法の開発と細胞内微細構造ダイナミクス研究への応用

研究課題

研究課題/領域番号 18K19962
研究機関国立研究開発法人産業技術総合研究所

研究代表者

谷 知己  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 生命工学領域, 研究グループ長 (80332378)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2024-03-31
キーワードライトシート顕微鏡 / 細胞骨格 / 蛍光偏光 / 分子配向
研究実績の概要

前年度までに開発した、直交する2軸のライトシートによる等方的な偏光照明光学系の確立に加え、今年度は観察光学系を光学基盤の直線上に構築することにより、これまでの蛍光偏光計測において課題となっていた、45度折り曲げミラーおよびダイクロイックミラーによる45度の偏光透過軸と135度の偏光透過軸間の消光比の劣化を解消し、0度と90度の偏光透過軸と同様に高い消光比を持つ蛍光偏光観察光学系を完成させた。一方で、新たに構築した観察光学系は光学基盤上に水平の光路をもつため、水平向きとなるディッピング水浸対物レンズに対しては、水漏れしないように工夫された観察試料保持用チェンバーの開発が必要となった。今年度はこの点をクリアした観察試料保持用チェンバーおよび、3次元断層撮影時にチェンバー内で観察試料のみを(チェンバー全体は動かさずに)光軸方向に動かすピエゾステージ操作法の開発により、単一細胞内の突起構造などの細胞内微細構造から、小型魚類胚全体まで、サブミクロンからミリの幅広い空間的広がりのレンジにおける生体分子配向観察を可能とする実用化システムが完成した。今年度は高NAディッピング水浸対物レンズを用いた線虫の個体イメージングおよびその体内における胚発生の観察、またショウジョウバエ胚内の臓器形成を観察対象として、多細胞個体の断層イメージングにおける分子配向観察をすすめた。また、乾燥系低倍レンズを用いた透明化組織観察では、3ミリ立方程度の広がりをもつメダカ成魚脳のほぼ全体像を3次元的に画像取得できた。このような3次元分子配向観察は多細胞生物の個体発生や臓器オルガノイド形成など、3次元組織の形態形成メカニズムを明らかにする上で活用されることが期待される。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2024 2023

すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (3件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Orientation-Independent-DIC imaging reveals that a transient rise in depletion force contributes to mitotic chromosome condensation2024

    • 著者名/発表者名
      Iida Shiori、Ide Satoru、Tamura Sachiko、Tani Tomomi、Goto Tatsuhiko、Shribak Michael、Maeshima Kazuhiro
    • 雑誌名

      bioRxiv

      巻: - ページ: -

    • DOI

      10.1101/2023.11.11.566679

    • オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Live-cell imaging under centrifugation characterized the cellular force for nuclear centration in the Caenorhabditis elegans embryo2024

    • 著者名/発表者名
      Makoto Goda, Michael Shribak, Zenki Ikeda, Naobumi Okada, Tomomi Tani, Gohta Goshima, Rudolf Oldenbourg, Akatsuki Kimura
    • 雑誌名

      bioRxiv

      巻: - ページ: -

    • DOI

      10.1101/2024.01.03.574024

    • オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] Self-organization of actin retrograde flow in lamellipodia2023

    • 著者名/発表者名
      Tomomi Tani, Nori Nakai, Keisuke Sato, Sumio Terada
    • 学会等名
      第61回日本生物物理学会年会
  • [学会発表] 蛍光1分子偏光観察と分子配向プローブ技術で読み解く生体内超分子構造ダイナミクス2023

    • 著者名/発表者名
      谷知己、中井紀、佐藤啓介、寺田純雄
    • 学会等名
      第32回日本バイオイメージング学会学術集会
  • [学会発表] ウッズホール海洋生物学研究所の研究と教育2023

    • 著者名/発表者名
      谷知己
    • 学会等名
      第5回JAMBIO国際シンポジウム
    • 国際学会 / 招待講演

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公開日: 2024-12-25  

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