| 研究課題/領域番号 |
18KK0256
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
荒木 慶彦 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 先任准教授 (70250933)
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| 研究分担者 |
小倉 淳郎 国立研究開発法人理化学研究所, バイオリソース研究センター, 室長 (20194524)
眞貝 洋一 国立研究開発法人理化学研究所, 開拓研究本部, 主任研究員 (20211972)
藤原 浩 金沢大学, 医学系, 教授 (30252456)
鏡 京介 金沢大学, 附属病院, 医員 (80748616)
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| 研究期間 (年度) |
2018-10-09 – 2024-03-31
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| キーワード | 卵管 / ハムスター / Ovgp1 / 遺伝子編集 |
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| 研究実績の概要 |
哺乳類の受精・初期発生は卵管内腔で行われ、胚は子宮に着床し妊娠が成立する。全能性を持つ幹細胞（胚）の発生を浮遊状態のまま液性因子により厳密に制御する卵管は特殊な器官であり、その微小環境の研究は細胞生物学的には極めて重要である。
一般に幹細胞はニッチと呼ばれる特定の場に接着して増殖・分化の調節を受ける一方で、循環系などにも種々の幹細胞が存在するが、これら浮遊状態の幹細胞に対する調節機構は不明な点が多い。
本研究では我々のこれまでの卵管の胚発生に対する生理的作用の研究成果をさらに展開し、浮遊状態における幹細胞の機能・分化を調節する液性因子（群）の同定、及びその機構解明を最終目標にする。
哺乳類の中で、ハムスター胚は体外培養が難しく、卵管は胚の生理環境維持に必須と考えられる。そこでまず卵管特異的な液性因子であるOvgp1などを対象とした遺伝子改変ハムスターを作製しその卵管微小環境の多角的評価を試みる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は以下の実験を行った。
1) CRISPR-Cas9システムを用いたOvgp1KOハムスターの作製：ハムスターOvgp1遺伝子のエクソン構造を欠失するように設計したガイドRNAとCas9酵素をハムスター受精卵に共誘導した後、偽妊娠ハムスター子宮に移植し新生仔を得た。新生仔の遺伝子配列を確認し、常法に従いOvgp1KOハムスターを樹立した。
2) Ovgp1KOハムスターのin vivoにおける妊孕性及びin vitro受精能の検討: Ovgp1KOマウスの先行研究に従い、in vivo及び in vitro生殖生理学的表現型の解析を現在進めている。
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| 今後の研究の推進方策 |
ここまでは特に問題なく計画通りに進捗している。
来年度以降は研究計画どおりこの遺伝子編集KOハムスターの生殖生理を多角的に解析する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
代表者の所属する研究所・実験動物施設更新工事のため一部の研究を中断せざるを得なかった。
次年度は特に問題なく研究計画を遂行可能である。
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