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生体へのストレス負荷により、様々な生理応答が惹起され、生体ホメオスタシスの維持を保つシステムが作動する。本研究では、生体への小胞体ストレス負荷により、小胞体における折り畳み不完全なタンパク質の蓄積によって誘発される生体のストレス応答システムの解明を試みた。昨年度までの研究結果の結果、小胞体ストレス誘発試薬であるツニカマイシン投与後、血液中でいくつかのmiRNAの発現が変動する可能性がmiRNA網羅解析スクリーニングシステムを実施した結果、明らかになった。そこで、本年度においては、発現変動が特に顕著であった個々の因子に関して、個別にプライマーを作成してqPCR解析での検討を試みた。しかし、個別にプライマーを作成して行ったqPCR解析ではそのような因子の有意な差を見出すことができなかった。動物のロットやツニカマイシン投与条件の変更など、様々な条件検討を行ったが、有意な差を見出すことができなかった。その原因として、網羅解析スクリーニングシステムとqPCRシステムでは検出方法が異なる点に起因している可能性があるが詳細は不明である。さらに小胞体ストレス誘起試薬であるツニカマイシンを腹腔内投与し小胞体ストレスを誘導させ、24時間後の血液中において発現変動するタンパク質を検討した。銀染色による解析の結果、いくつかの因子が小胞体ストレスによって変動することが確かめられた。そこで、これらの候補因子についてnanoLC-MS/MS解析を行いタンパク質の同定を行った。その後、本候補因子に関して、特異的抗体を用いた解析を行ったが、特異的抗体では再現性よく小胞体ストレスによって変動することが確認できなかった。
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