メタロプロテアーゼによる組織内微小環境因子代謝の作用機構解明と制御

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19109004
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 岡田 保典 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00115221)
• 研究分担者: 望月 早月 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (80365428) ; 下田 将之 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (70383734) ; 藤井 豊 福井大学, 医学部, 教授 (80211522)
• キーワード: MMP / ADAM / ノックアウトマウス / ELISA / 癌転移

研究概要

MMP-13遺伝子欠損(KO)マウスと野生型マウスを用いて、マウス前立腺癌細胞株を脛骨骨髄内、皮下組織、筋肉内、脛骨骨膜周囲へ移植し、癌細胞の生着・増殖能を検討した。その結果、脛骨骨髄内ではいずれのマウス群においても癌細胞は生着しなかったが、その他の上記組織での生着率はMMP-13KOマウスで有意に低かった。皮下組織移植モデルでの解析により、MMP-13KOマウスでは移植した癌細胞のアポトーシス亢進が生着率低下の原因であることが示された。
ADAM28KOマウス作製のために、相同領域の長さを充分に長くしたターゲティングベクターを完成させ、ES細胞への遺伝子導入と薬剤耐性セレクションにより、いくつかの候補クローンを得た。現在、サザンブロット解析により再スクリーニングを行っている。血清中ADAM28を測定可能な高感度ELISA系を開発し、ヒト非小細胞性肺癌患者血清中のADAM28レベルが肺癌患者における病期、リンパ節転移、術後再発の予測に有用であることを示した。また、yeast two-hybrid法によりヒト肺cDNAライブラリーをスクリーニングし、ADAM28結合分子としてvon Willebrand factor(VWF)を同定するとともに、ADAM28がVWFを切断することを証明した。さらに、ADAM28はVWF誘導性癌細胞アポトーシスをその分解により回避させ、癌細胞の血管内での生存延長により癌細胞転移促進に働いていることをin vitroとin vivoの実験で明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] ADAM28 is a serological and histochemical marker for non-small-cell lung cancers. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kuroda H., Mochizuki S., Shimoda M., Chijiiwa M., Kamiya K., Izumi Y., Watanabe M., Horinouchi H., Kawamura M., Kobayashi K., Okada Y.
  • 雑誌名: Int J Cancer (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAM28 as a target for human cancers. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mochizuki S., Okada Y.
  • 雑誌名: Curr.Pharm.Des. 15 ページ: 2349-2358
  • 査読あり
• [雑誌論文] MMP-13 plays a role in migration, angiogenesis and contraction in mouse skin wound healing. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hattori N., Mochizuki S., Kishi K., Nakajima T., Takaishi H., D'Armiento J., Okada Y.
  • 雑誌名: Am.J.Pathol. 175 ページ: 533-546
  • 査読あり
• [学会発表] ADAMs in tumor growth and progression. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yasunori Okada
  • 学会等名: Gordon Research Conference on MMPs.
  • 発表場所: Les Diablerets, Switzerland.
  • 年月日: 2009-09-03
• [図書] Kelley's Textbook of Rheumatology.(Proteinases and matrix degradation.) (2009)
  • 著者名/発表者名: Okada Y.
  • 総ページ数: 19
  • 出版者: Elsevier Saunders.
• [備考]
  • URL: http://keio-okada-lab.jp/