| 研究概要 |
T細胞の抗原認識と活性化のユニットであると考えられるTCRミクロクラスター(TCR-MC)の形成とその機能と制御機構の解析を目指した。CD3ζ-knock inマウスを作製して、そのT細胞を用いることで、生理的条件下でTCR-MCが同様に誘導形成されることが判明し、その定量的解析が可能となった。
抗原認識におけるTCR-MCの役割を解析するために、非自己と自己ペプチドをcovalent結合させたMHCを比率を変えて資質二重膜の上に発現させて解析した結果、アゴニストペプチドで形成されるミクロクラスターには自己ペプチドが共存せず、CD4+T細胞では自己ペプチドの関与は否定的であることが示唆された。
TCR-MCによるシグナルソームと活性化制御の解析に関しては、T細胞活性化に不可欠な副刺激シグナルおよび脂質ラフトとTCR-MCとの関係を解析した。CD28を介する副刺激受容体を介するシグナル伝達系の、TCRミクロクラスターとの動態の関係を解析した。活性化初期では、CD28もTCR-MCに集まりPKCθをリクルートして会合し、免疫シナプス形成後には、シナプスの中心にCD28-PKCθが集結して、副刺激シグナルの維持を行い、T細胞活性化維持に貢献することが明らかになった。
一方、LAT,Lck,Lynを含む異なるラフトマーカーを用いることによって、脂質ラフトはTCR-MCと同じようにはクラスターを形成しないことが判明し、活性化シグナルはラフトの凝集を介しては誘導されず、蛋白相互作用によると思われる。
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