物性の人工制御による高難度タンパク質の新規生産・解析手段の開発と応用

2009 年度 自己評価報告書

• 研究課題/領域番号: 19206085
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 山田 秀徳 岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 教授 (80037613)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2010
• キーワード: バイオテクノロジー / 生物・生体工学 / 蛋白質 / 化学修飾 / 結晶化 / 可溶化

研究概要

本研究ではタンパク質カチオン化技術を基本とした化学修飾法によるタンパク質の物性制御に関する独自技術を発展的に活用し、新規なタンパク質機能解析や人工タンパク質の生産技術に関する新たな研究用ツールの提供と、次世代のタンパク質医薬品の創製に資する基盤技術を確立する。さらにタンパク質の結晶中での分子配向性を人為的に制御する新規なタンパク質結晶工学技術等を基盤として、難結晶性タンパク質の結晶化と構造解析を可能する課題にも取り組む。これらの技術を総合的に組み合わせ、従来技術では取り扱いが困難な高難度タンパク質を基礎研究から実用化分野にまで取り扱いを可能とするタンパク質工学の基盤技術を確立することを目的とする。

研究成果

• [雑誌論文] Polyethylenimine-cationized-catenin protein transduction activates the Wnt canonical signaling pathway more effectively than cationic lipid-based transduction (2010)
  • 著者名/発表者名: Midori Kitazoe, Junichiro Futami, Mitsuo Nishikawa, Hidenori Yamada, Yoshitake Maeda
  • 雑誌名: Biotechnology Journal 5 ページ: 385-392
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transient cell proliferation with polyethylenimine-cationized N-terminal domain of Simian Virus 40 large T-antigen (2008)
  • 著者名/発表者名: Murata H., Futami J., Kitazoe M., Kosaka M., Tada H., Seno M., Yamada H.
  • 雑誌名: J.Biosci.Bioeng 105 ページ: 34-38
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intracellular delivery of glutathione S-transferase-fused proteins into mammalian cells by polyethylenimine-glutathione conjugates (2008)
  • 著者名/発表者名: Hitoshi Murata, Junichiro Futami, Midori Kitazoe, Takayuki Yonehara, Hidetaka Nakanishi, Megumi Kosaka, Hiroko Tada, Masakiyo Sakaguchi, Yasuyuki Yagi, Masaharu Seno, Nam-ho Huh, Hidenori Yamada
  • 雑誌名: Journal of Biochemistry 144(4) ページ: 447-455
  • 査読あり
• [雑誌論文] Design of cytotoxic ribonucleases by cationization to enhance intracellular protein delivery (2008)
  • 著者名/発表者名: Junichiro Futami, Hidenori Yamada
  • 雑誌名: Cur.Pharm.Biotechnol 9 ページ: 180-184
  • 査読あり
• [学会発表] (*原研) 結晶格子工学によるウシRNase Aの結晶空間群の変更 (2008)
  • 著者名/発表者名: 土井慎一, 小坂恵, 二見淳一郎, 多田宏子, 玉田太郎, 岡崎伸生, 黒木良太, 山田秀徳
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会 (BMB2008)
  • 年月日: 2008-12-12
• [学会発表] 変性タンパク質の可溶化と細胞内導入を目的とした新規SH基多価カチオン化試薬の合成と解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 穴井祐介, 矢木恵一郎, 二見淳一郎, 小坂恵, 多田宏子, 山田秀徳
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会 (BMB2008)
  • 年月日: 2008-12-12
• [学会発表] タンパク質カチオン化技術の医用工学への応用 (2008)
  • 著者名/発表者名: 二見淳一郎
  • 学会等名: 大阪大学蛋白質研究所セミナー : 蛋白質を創る、知る、使う～蛋白質科学と産業応用
  • 年月日: 2008-09-29
• [産業財産権] チオスルホナート化合物、タンパク質及び/又はペプチドの可逆的カチオン化剤並びに可溶化方法 (2010)
  • 発明者名: 二見淳一郎, 山田秀徳, 久良木豪, 矢木恵一郎
  • 権利者名: 岡山大学
  • 産業財産権番号: 特許2010-070804
  • 出願年月日: 2010-03-25