| 研究概要 |
高等真核細胞のクロマチン構造の構築・変換の分子機構を解明するため、それに関与する重要因子であるHIRA,ASF1,HAT1,CAF-1,GCN5,E2A等のDT40変異株を作成・解析して、以下のような成果を得た。
・HAT1は細胞質の新生ヒストンH4のLys-5, Lys-12をアセチル化するとともに、クロマチン結合性ヒストンH4のLys-5のアセチル化も触媒すること、DNA複製とカップルしたクロマチンアセンブリーには必要でないこと、MMSやCPTによるDNA複製阻害で誘起されるDNA障害の修復に関与することなどを明らかにした。
・HAT1は細胞質のヒストンH3-H4を含む複合体のintegrityをコントロールすることを明らかにした。
・HUやAPH等のDNA複製阻害剤で誘起されるS期チェックポイントキナーゼChk1の活性化はCAF-1非存在下で著しく減少し、DNA複製チェックポイントを介したシグナル伝達にCAF-1それ自体か、CAF-1による新生DNA鎖上での急速なヌクレオソーム形成が重要な役割を果たしている可能性が示唆された。
・ASF1はCAF-1と同様に酵母と異なって、DT40の細胞増殖に必須であり、その欠損はDNA合成能低下を伴うS期進行遅延、multipolar spindles形成などを伴って死滅することを明らかにした。
・HATの1種であるGCN5はBCR signallingと共同して、クロマチン構造を変化させ、ICAD,IAP2遺伝子の転写量の減少を介して、未熟B細胞のアポトーシスを制御することを明らかにした。
・転写因子E2AはBCR signallingと共同して、survivin, IAP2, caspase-8遺伝子の転写量の減少を介して、未熟B細胞のアポトーシスを制御することを明らかにした。
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