無細胞系分子ディスプレイシステムの構築と応用

2009 年度 自己評価報告書

• 研究課題/領域番号: 19360373
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 中野 秀雄 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 教授 (00237348)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2010
• キーワード: エマルジョンPCR / 無細胞タンパク質合成系 / マイクロチャネル乳化 / ペプチド / ビーズディスプレイ

研究概要

我々は無細胞の反応系のみで構築された、進化分子工学のためのシステム(ビーズディスプレイ)を開発し、新規タンパク質の創製に応用することを目的としている。具体的には1)均一エマルジョンを用いたビーズディスプレイシステムの構築、2)セルソーターによるハイスループットスクリーニング技術の開発3)イメージング質量分析計を用いたハイスループットスクリーニング技術の開発、を当初の目的とした。

研究成果

• [雑誌論文] Directed Evolution of Angiotensin II-inhibiting Peptides Using Microbeads Display (2010)
  • 著者名/発表者名: Gan, R., Furuzawa, S., Kojima, T., Kanie, K., Kato, R., Okochi, M., Honda, H. Nakano, H
  • 雑誌名: J.Biosci.Bioeng 109 ページ: 411-417
  • 査読あり
• [雑誌論文] エマルジョンPCRが拓く分子間相互作用ハイスループットスクリーニング (2009)
  • 著者名/発表者名: 兒島孝明, 甘睿, 中野秀雄
  • 雑誌名: 生物工学会誌 87 ページ: 283-286
  • 査読あり
• [雑誌論文] Microbeads display of proteins using emulsion PCR and cell-free protein synthesis (2008)
  • 著者名/発表者名: Gan, R, Yamanaka, Y, Kojima, T, Nakano, H.
  • 雑誌名: Biotechnol.Prog. 24 ページ: 1107-1114
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-throughput Screening of DNA Binding Sites for Transcription Factor AmyR from Aspergillus nidulans Using DNA Beads Display System
  • 著者名/発表者名: Kojima, T., Hashimoto, Y., Kato, M., Kobayashi, T. Nakano, H.
  • 雑誌名: J.Biosci.Bioeng (in press)
  • 査読あり
• [学会発表] ビーズディスプレイ法におけるDNA-蛋白質複合体の安定化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三上友美子, 松田英樹, 松井大悟, 兒島孝明, 中野秀雄
  • 学会等名: 日本農芸化学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-03-29
• [学会発表] エマルジョン培養法による分泌酵素産生菌の選択的濃縮 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長尾伸人、安東大介、小島晃代、河原崎泰昌、見島孝明、中野秀雄
  • 学会等名: 日本生物工学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2009-09-22
• [学会発表] ビーズディスプレイ法を用いたリパーゼのハイスループットスクリーニング法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 松井大悟、浅賀由香理、甘睿、兒島孝明、中野秀雄
  • 学会等名: 日本生物工学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2009-09-22
• [学会発表] High-throughput Screening of DNA Binding Sites for Transcription Factor, AmyR, from Aspergillus nidulans Using Beads Display System of DNA (2008)
  • 著者名/発表者名: Tadakaaki Kojima, Yoko Hashimoto, Masashi Kato, Tetsuya Kobayashi, Hideo Nakano
  • 学会等名: 4th Korea-Japan Workshop on Combinatorial Bioengineering
  • 発表場所: Seoul
  • 年月日: 2008-11-21
• [学会発表] Beads display : a Novel Technology to Explore Functional Biomolecules (2008)
  • 著者名/発表者名: Hideo Nakano
  • 学会等名: 4th Korea-Japan Workshop on Combinatorial Bioengineering
  • 発表場所: Seoul
  • 年月日: 2008-11-21
• [学会発表] Beads Display System of Proteins Using Emulsion PCR and Cell-free Protein Synthesis (2008)
  • 著者名/発表者名: Takaaki Kojima, Rui Gan, Yumiko Yamanaka, Hideo Nakano
  • 学会等名: 12th KOREAN PEPTIDE-PROTEIN SOCIETY SYMPOSIUM
  • 発表場所: Seoul
  • 年月日: 2008-11-20
• [学会発表] Genotype-Phenotype Coupling Screening of DNA Molecules Displayed on Microbeads by Using Cell-free Protein (2008)
  • 著者名/発表者名: Rui GAN, Yumiko YAMANAKA, Hideo NAKANO
  • 学会等名: Synthesis Biocat2008
  • 発表場所: Hamburg Germany
  • 年月日: 2008-09-01
• [学会発表] DNAのビーズディスプレイ法を用いたDNA-転写因子間相互作用検出法 (2008)
  • 著者名/発表者名: 兒島孝明, 橋本陽子, 加藤雅士, 小林哲夫, 中野秀雄
  • 学会等名: 日本生物工学会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2008-08-28
• [学会発表] 無細胞蛋白質合成系を用いたマイクロビーズ上での分子ディスプレイ法の開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 古澤聖司, Rui GAN, 中野秀雄
  • 学会等名: 日本農芸化学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2008-03-28
• [学会発表] Microbeads Display of Proteins Using Emulsion PCR and Cell-free Protein Synthesis (2008)
  • 著者名/発表者名: Rui GAN, Yumiko YAMANAKA, Takaaki KOJIMA, Hideo NAKANO
  • 学会等名: 日本農芸化学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2008-03-28
• [学会発表] DNAのビーズディスプレイ法を用いたDNA転写因子間相互作用検出法 (2007)
  • 著者名/発表者名: 橋本陽子, 兒島孝明, 加藤雅士, 小林哲夫, 中野秀雄
  • 学会等名: 日本生物工学会
  • 発表場所: 東広島
  • 年月日: 2007-09-18
• [産業財産権] 分子ディスプレイ法及びその用途 (2008)
  • 発明者名: 中野秀雄, 古澤聖司
  • 権利者名: 名古屋大学
  • 産業財産権番号: 特許2009-178067
  • 出願年月日: 2008-01-29