研究課題/領域番号 |
19380022
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研究機関 | 九州大学 |
研究代表者 |
湯浅 高志 九州大学, 農学研究院, 准教授 (40312269)
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研究分担者 |
井上 眞理 九州大学, 農学研究院, 教授 (60091394)
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キーワード | SNF1関連キナーゼ / カルシニューリンB / 塩ストレス / 果実 / トレハロース / 低温ストレス / 水チャンネル / 発芽 |
研究概要 |
1.トマト果実特異的に発現するSNF1関連タンパク質リン酸化酵素の解析 植物SNF1関連キナーゼ(SnRK)がストレス応答に関与することが明らかとなった。トマトから(SISnRK2C)をクローニングし、特異抗体を作成した。イムノブロットによりSISnRK工2Cが若い果実で顕著に発現することを明らかにした。アグロインフィルタレーション法による一過性発現系と免疫沈降実験を組み合わせ、リン酸化タンパク質特異的蛍光色素ProQダイヤモンドによる非RIリン酸化タンパク質検出法によりSISnRK2C活性を解析し、SISnRK2Cが低温と塩処理により活性化することを示した。 2.高等植物のカルシニューリンB様分子結合キナーゼとストレス応答の解析 塩ストレス応答とイオン輸送調節に機能するSnRK3(カルシニューリンB様分子(CBL)結合タパク質リン酸化酵素、CIPK)に着目し、希釈海水処理によるトマト果実の糖度上昇メカニズムにおけるCBLとC正PKの役割について解析した。抗-CIPK抗体を作成し、トマト、ニガウリにおけるCIPK関連分子の性状を解析した。トマトより塩耐性に関与するCBL関連分子SOS3遺伝子をクローニングし、その発現を解析した。抗-トマトSOS3抗体を作成し、トマトに おけるSOS3の細胞内局在と塩ストレスに誘導されたSOS3タンパク質の発現上昇を明らかにした。 3.トマトのトレハロース合成酵素のクローニングと低温耐性獲得メカニズムの解析 ストレス耐性に関与する二単糖トレハロースの合成を律速するトレハロース6リン酸合成酵素SITPS1をトマトからクローニングした。低温ストレスによりSITPS1mRNAレベルが顕著に上昇することが明らかになった。トマト組織の低温誘導性細胞死がトレハロース処理により抑制させることを示した。
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