研究課題
Lol因子間の相互作用部位を光架橋反応により調べた。アンバー変異特異的に光架橋性のp-benzoyl-phenylalanine(pBPA)を導入するために考案された方法により、Lol因子またはリポ蛋白質にpBPAを導入した。LolAとLolBのアンバー変異により、生育はpBPAを要求し、培地にpBPAが無いと欠失変異体が発現し生育は停止した。アンバー変異を導入したLol因子と、架橋反応を調べたいLol因子を共に大量発現し、UV照射により架橋反応を起こさせた。その結果LolBと相互作用するLolAの領域は、疎水性キャビティの入り口であった。またこの領域はLolCと相互作用する領域であった。すなわち、LolAの同じ領域がLolCやLolBと相互作用することが明らかになった。一方、Lol.AとLolE間では架橋産物は生じなかった。さらに、LolBがLolAと相互作用する領域も疎水性キャビティの入り口であった。LolA-LolB間では、"口移し"でリポ蛋白質が受け渡されることを明らかにした。リポ蛋白質と相互作用するLolAとLolBの部位は、いずれも疎水性キャビティの内側にあった。リポ蛋白質の結合がLol因子間の相互作用に与える影響を調べた。LolCDEにリポ蛋白質が結合している場合は、LolA-LolC間の架橋産物量は増加し、一方、LolAにリポ蛋白質が結合している場合は、LolA-LolC間の架橋産物は生成しなかった。この結果は、リポ蛋白質が外膜に一方向的に輸送される反応に好都合である。
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