ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤による初期化促進の分子機構解明とその応用

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19380161
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 岸上 哲士 近畿大学, 生物理工学部, 准教授 (10291064)
• 研究協力者: 若山 照彦 理化学研究所・神戸研究所, チームリーダー (40360672) ; 佐伯 和弘 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (10298937)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: 発生工学 / 核の初期化

研究概要

世界初のクローンヒツジ「ドリー」の報告以来、クローン動物の作出効率は動物種によらずわずか数%と低率であった。本研究代表者は、クローン胚をヒストン脱アセチル化酵素阻害剤(HDACi)、トリコスタチンA(trichostatin A, TSA)で処理することでクローンマウスの作出効率が大幅に改善されることを発見した。本課題ではその作出効率改善の機構解明として発生におけるHDAC酵素やタンパク質アセチル化の重要性を明らかにし、さらにこれまで不可能であったマウス系統からのクローンマウスの作出に世界で初めて成功した。

研究成果

• [雑誌論文] How to improve the success rate of mouse cloning technology (2010)
  • 著者名/発表者名: Thuan NV, Kishigami S, Wakayama T
  • 雑誌名: J Reprod Dev Vol.56,No.2 ページ: 20-30
  • 査読あり
• [雑誌論文] The histone deacetylase inhibitor scriptaid enhances nascent mRNA production and rescues full-term development in cloned inbred mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Van Thuan N, Bui HT, Kim JH, Hikichi T, Wakayama S, Kishigami S, Mizutani E, Wakayama T
  • 雑誌名: Reproduction Vol.138,No.2 ページ: 309-317
  • 査読あり
• [雑誌論文] The cytoplasm of mouse germinal vesicle stage oocytes can enhance somatic cell nuclear reprogramming (2008)
  • 著者名/発表者名: Bui HT, Wakayama S, Kishigami S, Kim JH, Van Thuan N, Wakayama T
  • 雑誌名: Development Vol.135,No.23 ページ: 3935-3945
  • 査読あり
• [雑誌論文] Somatic cell nuclear transfer: infinite reproduction of a unique diploid genome (2008)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S, Wakayama S, Hosoi Y, Iritani A, Wakayama T
  • 雑誌名: Exp Cell Res Vol.314,No.9 ページ: 1945-1950
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient strontium-induced activation of mouse oocytes in standard culture media by chelating calcium (2007)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S, Wakayama T
  • 雑誌名: J Reprod Dev Vol.53,No.6 ページ: 1207-1215
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of chromatin and chromosome morphology by histone H3 modifications in pig oocytes (2007)
  • 著者名/発表者名: Bui HT, Van Thuan N, Kishigami S, Wakayama S, Hikichi T, Ohta H, Mizutani E, Yamaoka E, Wakayama T, Miyano T
  • 雑誌名: Reproduction Vol.133,No.2 ページ: 371-382
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful mouse cloning of an outbred strain by trichostatin A treatment after somatic nuclear transfer. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S, et al.
  • 雑誌名: J Reprod Dev Vol.53,No.1 ページ: 165-170
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differentiation potential of parthenogenetic embryonic stem cells is improved by nuclear transfer (2007)
  • 著者名/発表者名: Hikichi T, Wakayama S, Mizutani E, Takashima Y, Kishigami S, Van Thuan N, Ohta H, Thuy Bui H, Nishikawa S, Wakayama T
  • 雑誌名: Stem Cells Vol.25,No.1 ページ: 46-53
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of mouse embryonic stem cell lines from somatic cell nuclei by nuclear transfer into aged, fertilization-failure mouse oocytes (2007)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S, Suetsugu R, Thuan NV, Ohta H, Kishigami S, Wakayama T
  • 雑誌名: Curr Biol Vol.17,No.4 ページ: R120-121
  • 査読あり
• [学会発表] A unique property of specified mouse blastomere in Cdx2 expression (2009)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S., et al.
  • 学会等名: 6th Asian Reproductive Biotechnology Conference
  • 発表場所: Siem Reap, Cambodia
  • 年月日: 2009-11-24
• [学会発表] The impact of EGTA as chelating calcium on oocyte activation in mice (2008)
  • 著者名/発表者名: Tsujimoto Y., et al.
  • 学会等名: 5th Asian Reproductive Biotechnology Conference
  • 発表場所: Yunnan, China
  • 年月日: 20081126-20081130
• [学会発表] ウシ体細胞核移植胚におけるトリコスタチンA処理の至適時間の検討 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高橋千明, ら
  • 学会等名: 平成20年度(第58回大会)関西畜産学会
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 20080902-20080903
• [学会発表] Effects of trichostatin A on gene expression and in-vitro development of bovine embryos cloned from transfected fibroblasts carrying a luciferase gene. (2008)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto D, et al.
  • 学会等名: 16th International Congress on Animal Reproduction
  • 発表場所: Budapest, Hungary
  • 年月日: 20080713-20080717
• [学会発表] Effects of trichostatin A on DNA methylation in cloned bovine embryos. (2008)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto D, et al.
  • 学会等名: 34th Annual Conference of International Embryo Transfer Society
  • 発表場所: Denver, USA
  • 年月日: 20080105-20080109
• [学会発表] オーダーメイド胚培養:移植される核の種類に適した体外培養を考える (2008)
  • 著者名/発表者名: 岸上哲士
  • 学会等名: 第11回日本IVF学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2008-10-14
• [学会発表] Somatic cell nuclear transfer with HDACi (2008)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S
  • 学会等名: 4th JSAR-KSAR Joint Symposium
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2008-06-20
• [学会発表] 発生工学におけるドラッグディスカバリー:クローン技術改善への試み (2007)
  • 著者名/発表者名: 岸上哲士
  • 学会等名: 発生工・疾患モデル研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20071000
• [学会発表] Histone deacetylases: key regulators to determine the efficiency of reprogramming after somatic-cell nuclear transfer (2007)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S
  • 学会等名: 5th Anniversary Congress of International Drug Discovery Science & Technology (IDDST)
  • 発表場所: Shanghai, China
  • 年月日: 20070500
• [学会発表] Abnormal cell adhesion in cloned mouse embryos (2007)
  • 著者名/発表者名: Suetsugu, S., et al.
  • 学会等名: 第40回日本発生生物学会大会(細胞生物学会合同)
  • 発表場所: 福岡国際会議場、福岡
  • 年月日: 20070500
• [学会発表] Effects of trichostatin A on development of bovine somatic cell nuclear transfer embryos. (2007)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto D, et al.
  • 学会等名: 33th Annual Conference of International Embryo Transfer Society
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 20070106-20070110
• [学会発表] Success of mouse cloning from an outbred strain by trichostatin a treatment after somatic nuclear transfer (2007)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S., et al.
  • 学会等名: 3rd Annual Conference of the International Embryo Transfer Society (IETS)
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 20070106-20070110
• [学会発表] Efficient strontium-induced activation of mouse oocytes in standard culture media by chelating calcium (2007)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S., Wakayama T
  • 学会等名: 4th Asian Reproductive Biotechnology Conference
  • 発表場所: Singapore
  • 年月日: 2007-11-24
• [学会発表] Oocyte activation by strontium in the presence of calcium supports full- term development of somatic cell cloned embryos (2007)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S., Wakayama T
  • 学会等名: 40th Annual meeting of the Society of Reproduction (SSR)
  • 発表場所: San Antonio, TX, USA
  • 年月日: 2007-07-21
• [図書] Nuclear Transfer with HDACi as a New Cloning Method((Lucas T. Dahnof編)) (2010)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Kishigami, Daisaku Iwamoto, Kazuhiro Saeki, Kazuya Matsumoto, Akira Iritani, Yoshihiko Hosoi著
  • 総ページ数: 329-334
  • 出版者: Nova Science Pub Inc
• [図書] 体細胞核移植におけるリプログラミング促進技術の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岸上哲士, 矢持隆之, 松原圭吾, 細井美彦著
  • 総ページ数: 43-46
  • 出版者: メディカルレビュー社
• [図書] 核移植とiPS細胞技術の比較:リプログラミングの効率化を目指して (2009)
  • 著者名/発表者名: 岸上哲士, 辻本賀子, 矢持隆之, 細井美彦著
  • 総ページ数: 223-227
  • 出版者: 秀潤社
• [図書] Gene knockout Protocols (Methods in Molecular Biologyシリーズ, Vol. 530) (Wolfgang Wurst編) (2009)
  • 著者名/発表者名: Sayaka Wakayama, Satoshi Kishigami, Teruhiko Wakayama著
  • 総ページ数: 516
  • 出版者: Humana Press
• [図書] 体細胞核移植におけるリプログラミング促進技術の開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 岸上哲士, 細井美彦著
  • 総ページ数: 270-273
  • 出版者: メディカルレビュー社
• [図書] Microinjection: Methods and Applications (Methods in Molecular Biologyシリーズ(David Carrol編) (2008)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Kishigami, Teruhiko Wakayama著
  • 総ページ数: 224
  • 出版者: Humana Press
• [図書] Genetic and Epigenetic Control of Mammalian Germ Cell Development and Function (Masami Nozaki編) (2008)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Kishigami, Hiroshi Ohta, Teruhiko Wakayama
  • 総ページ数: 133-152
• [図書] Progress in DNA Methylation Research (Hans P. Neumann編) (2008)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Kishigami著
  • 総ページ数: 256
  • 出版者: Nova Science Publishers Inc
• [図書] 体細胞核移植クローンとクローンES細胞の樹立 (2007)
  • 著者名/発表者名: 若山静香, 岸上哲士, 若山照彦著
  • 総ページ数: 2197-2202
  • 出版者: 共立出版
• [産業財産権] 核移植卵子の作製方法 (2006)
  • 発明者名: 岸上哲士
  • 権利者名: 独立行政法人理化学研究所、学校法人近畿大学,独立行政法人科学技術振興機構
  • 産業財産権番号: PCT出願・PCT/JP2006/319311
  • 出願年月日: 2006-09-28