Wnt5a・Ror2受容体チロシンキナーゼによる細胞移動・細胞極性制御機構の解析

2007 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19390076
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 南 康博 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (70229772)
• 研究分担者: 依田 成玄 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (70335454) ; 西田 満 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (30379359) ; 寒川 延子 神戸大学, 大学院・医学系研究科, COE研究員 (30432579)
• キーワード: Wnt5a / Ror2受容体チロシンキナーゼ / 細胞移動 / 細胞極性 / 細胞骨格再編成 / フィラミンA / JNK / シグナル伝達

研究概要

本年度の研究により、Wnt5a刺激に伴いRor2受容体チロシンキナーゼがセリン・スレオニンリン酸化を受け、そのリン酸化にglycogen synthase kinase3(GSK3)が関与すること、及びGSK3がWnt5aによる細胞移動に重要であることが明らかになった。次に、NIH3T3細胞を用いたin vitro wound healing assayを行い、Wnt5aがwound(創傷)後の細胞極性・細胞移動制御において重要な役割を担うことを見出した。Wnt5aによる細胞極性・細胞移動制御は、NIH3T3細胞におけるRor2の発現をsiRNAにより抑制すると消失することから、Ror2を介することが示された。Ror2の発現抑制を行うと、創傷時のWnt5aによる細胞極性化、すなわち創傷端でのアクチンフィラメントによる膜状突起形成や微小管形成中心の創傷端への配向などが抑制されることが明らかになった。また、創傷時のWnt5a刺激によりJNKが活性化されること、そのJNKの活性化にはRor2と会合しているアクチン結合タンパク質フィラミンAが必須であること、およびJNKの活性化を阻害すると、創傷時のWht5aによる細胞極性化・細胞移動が抑制されることが見出された。以上の結果から、in vitro wound healingにおいてWnt5a/Ror2/ファイラミンA/JNKというシグナル伝達経路が重要な役割を担うことが明らかとなった。さらに、創傷時のWnt5aによるJNKの活性化は、aPKCの一つであるPKCζを阻害すると抑制されることから、(最近他のグループにより報告された)Cdc42/Par6/aPKC経路と本研究により明らかとなったWnt5a/Ror2/ファイラミンA/JNK経路が機能的に連関している可能性が示唆される。

研究成果

• [雑誌論文] Ror2 modulates the canonical Wnt signaling in lung epithelialcells through cooperation with Fzd2. (2008)
  • 著者名/発表者名: Li, C., Chen, H., Hu, L., Xing, Y., Sasaki, T., Villosis, M. F., Li, J., Nishita, M., Minami, Y., and Minoo, P.
  • 雑誌名: BMC Mol. Biol. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wnt5a modulates glycogen synthase kinase 3 to inducephosphorylation of receptor tyrosine kinase Ror2. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, H., Yoo S-K., Nishita, M., Kikuchi, A., and Minami, Y.
  • 雑誌名: Genes Cells 12 ページ: 1215-1223
  • 査読あり
• [雑誌論文] A histone lysine methyltransferase activated by non-canonical Wnt signalling suppresses PPAR-γ transactivation. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takada, I., Mihara, M., Suzawa, M., Ohtake, F., Kobayashi, S., Igarashi, M., Youn, M-Y., Takeyama, K., Nakamura, T., Mezaki, Y., Takezawa, S., Yogiashi, Y., Kitagawa, H., Yamada, G., Takada, S., Minami, Y., Shibuya, H., Matsumoto, K., and Kato, S.
  • 雑誌名: Nat. Cell Biol. 9 ページ: 1273-1285
  • 査読あり
• [学会発表] Ror2 regulates cytoskeletal rearrangements to mediate Wnt5a-induced polarized cell migration (2007)
  • 著者名/発表者名: 西田満、野町昭、濱崎真弓、榎本真宏、南康博
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会第80回日本生化学学会大会合同大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 20071211-15
• [学会発表] Roles of receptor tyrosine kinase Ror2 in Wnt5a-induced non-canonical Wnt signaling (2007)
  • 著者名/発表者名: 南康博、兪史幹、菊池章、西田満
  • 学会等名: The Wnt meeting in La Jolla
  • 発表場所: San Diego, U. S. A.
  • 年月日: 20071003-05
• [学会発表] Ror2 Regulatates Cytoskeletal Rearraangements to Mediate Wnt5a-induced Polarized Cell Migration. (2007)
  • 著者名/発表者名: 野町昭、西田満、榎本真宏、濱崎真弓、南康博
  • 学会等名: アメリカ細胞生物学会
  • 発表場所: Washington D. C., U. S. A.
  • 年月日: 20071003-05
• [備考]
  • URL: http://www.med.kobe-u.ac.jp/medzoo/