転写因子を標的とする蛍光相関分光法を用いた新規病態検査法の開発

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19390155
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 熊谷 俊一 神戸大学, 医学研究科, 教授 (00153346)
• 研究分担者: 森信 暁雄 神戸大学, 医学研究科, 准教授 (10294216) ; 西村 邦宏 神戸大学, 医学研究科, 客員准教授 (70397834) ; 三枝 淳 神戸大学, 医学研究科, 特命助教 (20514970)
• キーワード: 自己免疫疾患 / 転写因子 / 生物製剤 / 蛍光相関分光法

研究概要

蛍光相関分光法(Fluorescence Correlation Spectroscopy ; FCS)を用いた転写因子活性の確立と関節リウマチ、アレルギー疾患への応用。
(1)蛍光相関分光法(Fluorescence Correlation Spectroscopy ; FCS)を用いた測定系の確立のため、転写因子活性の測定系の基礎的検討を行った。主にリコンビナント蛋白を用いて行い良好な標準曲線を得た。
(2)FCSによる健常人培養リンパ球核抽出液を用いた転写因子活性測定系の確立。さまざまな条件化で、正常人リンパ球を活性化し、核抽出物を単離し転写因子活性を測定した。同時に市販の転写因子ELISAを用いてその確からしさを検討した。
(3)FCSによる健常人及び患者末梢血単核球の転写因子活性測定。その予備段階として、関節リウマチ患者末梢血から単核球を採取し、核内蛋白を抽出し、さまざまな転写因子をELISA系で測定した。同時に、健常人をコントロールとした。測定項目は、NFkB、NFAT、AP-1、STAT1、STAT3、IRF-1である。なかでもRA患者においてはNFkB、STAT3の高値例が存在することが明らかとなった。
(4)生物製剤投与前後の平時的変化を10名の患者で観察したところ、NFkBの活性が低下する例が見られた
(5)NFkBのいずれが活性変化するのかを数種類のキットを用いて検討するために、サンプルを収集した。P65ga主たる活性化NfkBであることが判明した。

研究成果

• [雑誌論文] Lack of association between tyrosine kinase2(TYK2)gene polymorphisms and susceptibility to SLE in a Japanese population. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kyogoku C, Morinobu A, Nishimura K, Sugiyama D, Hashimoto H, Tokano Y, Mimori T, Terao C, Matsuda F, Kuno T, Kumagai S
  • 雑誌名: Mod Rheumatol. 19(4) ページ: 401-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNA-124a is a key regulator of proliferation and monocyte chemoattractant protein 1 secretion in fibroblast-like synoviocytes from patients with rheumatoid arthritis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakamachi Y, Kawano S, Takenokuchi M, Nishimura K, Sakai Y, Chin T, Saura R, Kurosaka M, Kumagai S
  • 雑誌名: Arthritis Rheum. 60(5) ページ: 1294-304
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of smoking as a risk factor for developing rheumatoid arthritis : a meta-analysis of observational studies. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama D, nishimura K, Tamaki K, Tsuji G, Nakazawa T, Morinobu A, Kumagai S
  • 雑誌名: Anh Rheum Dis 69 ページ: 70-81
  • 査読あり
• [学会発表] Prevalence of Anti-Cyclic Citrullinated Peptide Antibody and Its Association with Smoking in General Population : a Cross Sectional Study. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kumagai S, Hayashi N, Kawano S, Sugiyama D, Nishimura K, Kasagi S, Saegusa J, Morinobou A
  • 学会等名: 第75回米国リウマチ学会
  • 発表場所: サンフランシスコ(アメリカ合衆国)
  • 年月日: 20091018-20091021
• [学会発表] Secretory Phospholipase A2 Group Binds to Integrin v3 and Induces Proinflammatory Signaling. (2009)
  • 著者名/発表者名: Saegusa J, Fujita M, Tanaka S, Morinobu A, Kawano S, Takada Y, Kumagai S
  • 学会等名: 第75回米国リウマチ学会
  • 発表場所: サンフランシスコ(アメリカ合衆国)
  • 年月日: 20091018-20091021
• [学会発表] Anti-PD-1 Antibody Reduces CD4+PD-1+ T Cells and Relieves the Lupus-Like Nephritis of NZB/W F1 Mice. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kasagi S, Kawano S, Okazaki T, Honjo T, Morinobu A, Hatachi S, Shimatani K, Tanaka Y, Minato N, Kumagai S
  • 学会等名: 第75回米国リウマチ学会
  • 発表場所: サンフランシスコ(アメリカ合衆国)
  • 年月日: 20091018-20091021
• [学会発表] 関節リウマチ-診断と治療の最前線- (2009)
  • 著者名/発表者名: 熊谷俊一
  • 学会等名: 第56回日本臨床検査医学会・学術集会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(北海道)
  • 年月日: 2009-08-27
• [学会発表] 膠原病診断におけるマルチプレックス技術を用いた自己抗体スクリーニングの有効性の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 林伸英、生戸健一、河野誠司、熊谷俊一
  • 学会等名: 第53回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪(東京都)
  • 年月日: 2009-04-26
• [学会発表] 生物学的製剤を投与中の関節リウマチ患者における感染症の危険因子の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 上田奈つき、中澤隆、綾野雅宏、西川あゆみ、横田敏彦、杉山大典、熊谷俊一
  • 学会等名: 第53回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪(東京都)
  • 年月日: 2009-04-26
• [学会発表] エタネルセプト(Eta.)投与下にリステリア髄膜脳炎を発症した関節リウマチ(RA)の1例 (2009)
  • 著者名/発表者名: 西田美和、林宏樹、辻剛、三枝淳、杉本健、河野誠司、森信暁雄、熊谷俊一
  • 学会等名: 第53回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪(東京都)
  • 年月日: 2009-04-26
• [図書] チャート内科学診断 (2009)
  • 著者名/発表者名: 熊谷俊一
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] 臨床病理レヴュー (2009)
  • 著者名/発表者名: 辻剛、熊谷俊一
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 臨床病理刊行会
• [図書] 検査値アプローチ症候疾患 検査の評価法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 熊谷俊一
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 宇宙堂八木書店