| 研究概要 |
タンパク質をコードしない小さなRNA分子であるマイクロRNAは、発生・分化・増殖など様々な生命現象に関わっていると考えられている。代表的な癌抑制遺伝子であるp53と深い関連性をもつマイクロRNAも報告され注目を集めている。一方で、これらマイクロRNA自体の発現調節機構については、不明な点も多い。エピジェネティックな要因による発現制御も報告がある。脱メチル化剤(5-aza-2'-deoxycytidine)を、消化器癌由来の培養細胞に投与し、発現が回復するマイクロRNAをエピジェネティックな因子による発現制御を受けるマイクロRNA候補とし、解析を行った、約300のマイクロRNAが搭載されたマイクロアレイにて検出した。対象とした培養細胞は、食道癌由来(TE-1, TE-2)、肝細胞癌由来(HLE, Huh7、PLC/PRF/5)、大腸癌由来(DLD-1, HT-29)の培養細胞。5-aza-2'-deoxycytidine 1μMを96時間投与することによって、1.5倍以上の発現増加を認めたマイクロRNAを候補遺伝子とした。その中で、食道癌由来の培養細胞で発現が上昇したhsa-mir26bと、大腸癌由来の培養細胞発現が上昇したマイクロRNAの中で、miR-517a, 372, 373, 519, 520gに注目した。それぞれのマイクロRNAをトランスフェクションし、MTSアッセイにて、培養細胞の細胞増殖能を検討した。これらのマイクロRNAは、細胞増殖能を変化させることを明らかにした。Methylation specifc PCR法にて、大腸癌由来の培養細胞の検討において、プロモーター領域の異常メチル化を明らかにした。以上より、一部のマイクロRNAが、異常メチル化により発現が制御され、癌細胞の増殖に関与することが明らかになった。
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