新規クラス抗HCV薬開発に向けた抗ウイルス化合物・宿主蛋白の包括的探索

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19390196
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 坂本 直哉 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 寄附講座准教授 (10334418)
• 研究分担者: 田坂 めぐみ 東京医科歯科大学, 医学部・附属病院, 医員 (50510369)
• キーワード: HCVレプリコン / HVC-JFH1培養系

研究概要

当該研究期間において我々は、HCV感染・増殖細胞モデルを用いて薬剤・生理活性化合物・短鎖ペプチドの抗ウイルス作用の網羅的スクリーニング、およびHCV増殖に関連する宿主因子の探索を遂行し、以下の結果を得た。(1)HCV-Feo replicon細胞を用いてDiversity-Oriented Synthesis (DOS)法で合成した8,000種の化合物のスクリーニングを施行し、HCV増殖を抑制する41種の化合物を同定し、構造活性相関解析にIC50の優れた5個のepoxide誘導体を同定した。(2)HCV複製増殖に関与する代謝・シグナルネットワークの網羅的解析により、脂質・コレステロール代謝に関わる代謝・シグナルネットワークの関与、関連薬剤の効果を確認した。(3)漢方生薬成分化合物の細胞内HCV増殖に対する効果をHCVレプリコンシステムを用いて解析を行い、甘草由来の2種の化合物、isoliquiritigenin、及びglycycoumarinにHCV増殖抑制作用を見出した。今後これらの知見を統合し、HCV感染サイクルにおけるウイルスおよび宿主蛋白相互作用の細胞・分子レベルでの理解を深め、新規クラス抗HCV療法薬剤の開発・実用化に必要な基盤情報の蓄積を到達目標とし引き続き研究を遂行する。本研究で同定された化合物の作用機構の解析、小動物モデルを用いた効果・安全性の検証を進めることにより新たな抗ウイルス薬剤の開発につながると思われる。

研究成果

• [雑誌論文] A functional genomic screen identifies cellular cofactors of hepatitis C virus replication. (2009)
  • 著者名/発表者名: Andrew W. Tai, Yair Benita, Lee F. Peng, Sun-Suk Kim, Naoya Sakamoto, Ramnik J. Xavier, Raymond T. Chung
  • 雑誌名: Cell Host & Microbe In press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Signaling pathway via TNFa/NFnB in intestinal epithelial cells may be directly involved in colitis-associated carcinogenesis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Onizawa, Kanai T, Totsuka T, Okamoto R, Tsuchiya K, Nemoto Y, Nagaishi T, Sakamoto N, Watanabe M
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol In press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synergistic inhibition of intracellular hepatitis C virus replication by nelfinavir and interferon-a. (2009)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Toma, Tsuyoshi Yamashiro, Shingo Arakaki, Joji Shiroma, Tatsuji Maeshiro, Kenji Hibiya, Naoya Sakamoto, Fukunori Kinjo, Masao Tateyama, Jiro Fujita
  • 雑誌名: Journal of Viral Hepatitis In press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two flavonoids extracts from a herb, Glycyrrhizae radix, inhibit in-vitro hepatitis C virus replication. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sekine-Osajima Y, Sakamoto N, Nakagawa M, Itsui Y, Tasaka M, Nishimura-Sakurai Y, Chen CH, Suda G, Mishima K, Onuki Y, Yamamoto M, Maekawa S, Enomoto N, Kanai T, Tsuchiya K, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatoloj Res 39 ページ: 60-69
  • 査読あり
• [雑誌論文] FTY720 suppresses the development of colitis in lymphoid-null mice by modulating the trafficking of colitogenic CD4+ T cells in bone marrow. (2008)
  • 著者名/発表者名: Fujii T, Kanai T, Tomita T, Nemoto Y, Totsuka T, Sakamoto N, Nakamura T, Tsuchiya K, Okamoto R, Watanabe M
  • 雑誌名: Eur J Immunol 38 ページ: 3290-3303
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of hepatitis C virus infection and expression in vitro and in vivo by recombinant adenovirus expressing short hairpin RNA. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto N, Tanabe Y, Yokota T, Saito K, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Itsui Y, Tasaka M, Sakurai Y, Chen CH, Yano M, Ohkoshi S, Aoyagi Y, Maekawa S, Enomoto N, Kohara M, Watanabe M
  • 雑誌名: J Gastro Hepatol 23 ページ: 1437-1447
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of immunosuppressants on the progression of hepatitis C in hepatitis C virus-positive renal transplantation and the usefulness of interferon therapy. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nanmoku K, Imaizumi R, Tojimbara T, Nakajima I, Fuchinoue S, Sakamoto N, Watanabe M, Teraoka S
  • 雑誌名: Transplant Proc 40 ページ: 2382-2385
  • 査読あり
• [雑誌論文] Griseofulvin, an oral antifungal agent, suppresses HCV replication in vitro. (2008)
  • 著者名/発表者名: Jin H, Yamashita A, Maekawa S, Yang P, He L, Takayanagi S, Wakita T, Sakamoto N, Enomoto N, Ito M
  • 雑誌名: Hepatology Res 38 ページ: 909-918
  • 査読あり
• [雑誌論文] Continuous generation of colitogenic CD4+ T cells may be one of the mechanisms to persist colitis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomita T, Kanai T, Fujii T, Nemoto Y, Okamoto R, Tsuchiya K, Totsuka T, Sakamoto N. Watanabe M
  • 雑誌名: Eur J Immunol 38 ページ: 1264-1274
  • 査読あり
• [雑誌論文] MyD88-dependent Pathway in T Cells Directly Modulates the Expansion of Colitogenic CD4+ T Cells in Chronic Colitis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomita T, Kanai T, Fujii T, Nemoto Y, Okamoto R, Tsuchiya K, Totsuka T, Sakamoto N. Akira S, Watanabe M
  • 雑誌名: J Immunol 180 ページ: 5291-5299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potential relevance of cytoplasmic viral sensors and related regulators involving innate immunity in antiviral response. (2008)
  • 著者名/発表者名: Asahina Y, Izumi N, Hirayama I, Tanaka T, Sato M, Yasui Y, Komatsu N, Umeda N, Hosokawa T, Ueda K, Tsuchiya K, Nakanishi H, Itakura J, Kurosaki M, Enomoto N, Tasaka M, Sakamoto N, Miyake S
  • 雑誌名: Gastroenterology 134 ページ: 1396-1405
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunosenescent colitogenic CD4+ T cells convert to regulatory cells and suppress colitis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Totsuka T, Kanai T, Nemoto Y, Tomita T, Tsuchiya K, Sakamoto N, Okamoto R, Watanabe M
  • 雑誌名: Eur J Immunol 38 ページ: 1275-1286
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proteasomal degradation of Atohl by aberrant Wnt signaling maintains the undifferentiated state of colon cancer. (2008)
  • 著者名/発表者名: Aragaki M, Tsuchiya K, Okamoto R, Yoshioka S, Nakamura T, Sakamoto N, Kanai T, Watanabe M
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 368 ページ: 923-929
  • 査読あり
• [雑誌論文] Targeting lipid metabolism in the treatment of hepatitis C. (2008)
  • 著者名/発表者名: Amemiya F, Maekawa S, Itakura Y, Kanayama A, Takano S, Yamaguchi T, Itakura J, Kitamura T, Inoue T, Sakamoto M, Yamauchi K, Okada S, Sakamoto N, Enomoto N
  • 雑誌名: J Infect Dis 368 ページ: 361-370
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of plaque assays for hepatitis C virus and isolation of mutants with enhanced cytopathogenicity and replication capacity. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sekine-Osajima Y, Sakamoto N (equal contribution), Nakagawa M, Itsui Y, Tasaka M, Nishimura-Sakurai Y, Chen CH, Kanai T, Tsuchiya K, Wakita T, Enomoto N, Watanabe M
  • 雑誌名: Virology 368 ページ: 71-85
  • 査読あり
• [学会発表] Establishment and genetic analyzes of cytopathogenic HCV-JFH1 mutants by plaque-forming assay. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kako Mishima, Naoya Sakamoto. Yuko Sekine-Osajima, Mina Nakagawa, Megumi Tasaka, Yuki Nishimura-Sakurai, Yasuhiro Itsui, Takaji Wakita, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, CA, USA
  • 年月日: 2008-11-01
• [学会発表] Suppression of interferon induction and response pathway by Hepatitis C virus NS4B. (2008)
  • 著者名/発表者名: M. Tasakal, N. Sakamoto, M. Nakagawa, Y. Itsui, Y. Nishimura-Sakurai, C. Chen, Goki Suda, Kako Mishima, Machi Yamamoto, Yuko Onuki, M. Watanabe
  • 学会等名: Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, CA, USA
  • 年月日: 2008-11-01
• [学会発表] Pretreatment assessment of PEG-interferon plus ribavirin anti-HCV therapy using viral genetic profiles, NS5A-ISDR and Core mutations. (2008)
  • 著者名/発表者名: Naoya Sakamoto, Mina Nakagawa, Cheng-Hsin Chen, Yasuhiro Itsui, Megumi Tasaka, Nobuyuki Enomoto, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, CA, USA
  • 年月日: 2008-11-01
• [学会発表] THE ISOMERASE ACTIVITY OF CYCLOPHILIN A IS CRITICAL FOR HCV REPLICATION. (2008)
  • 著者名/発表者名: Bobardt M., Chatterji U., Selvarajah S., Tang H., Sakamoto N., Coelmont L., Neyts J., Dumont J. -M., Vuagniaux G., Gallay P.
  • 学会等名: 15th. International Meeting on Hepatitis C Virus & Related Viruses.
  • 発表場所: San Antonio, TX, USA
  • 年月日: 2008-10-04
• [学会発表] Establishment and genetic analyzes of cytopathogenic HCV-JFHI mutants by plaque-forming assay. (2008)
  • 著者名/発表者名: Naoya Sakamoto, Kako Mishima, Yuko Sekine-Osajima, Mina Nakagawa, Megumi Tasaka, Yuki Nishimura-Sakurai, Yasuhiro Itsui, Takaji Wakita, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: 15th. International Meeting on Hepatitis C Virus & Related Viruses.
  • 発表場所: San Antonio, TX, USA
  • 年月日: 2008-10-04
• [学会発表] A novel NS5B-interacting protein modulates hepatitis C virus replication. (2008)
  • 著者名/発表者名: Jing-Tang Huang, Ching-Ping Tseng, Naoya Sakamoto, Shao-Chun Lu, Chuan-Mu Chen, Ju-Chien Cheng
  • 学会等名: 15th. International Meeting on Hepatitis C Virus & Related Viruses.
  • 発表場所: San Antonio, TX, USA
  • 年月日: 2008-10-04