ヒト化モデルマウスを用いた次世代遺伝子治療法の開発:遺伝子修復による自己細胞再生

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19390285
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 原 寿郎 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (40150445)
• 研究分担者: 楠原 浩一 九州大学, 医学研究院, 准教授 (20243941) ; 高田 英俊 九州大学, 大学病院, 准教授 (70294931) ; 井原 健二 九州大学, 大学病院, 講師 (80294932) ; 中津 可道 九州大学, 医学研究院, 准教授 (00207820)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: 遺伝子治療 / 原発性免疫不全症候群 / 伴性劣性無ガンマグロブリン血症 / アデノAAVハイブリッドベクター / NOD / SCID / γc完全欠失マウス / B細胞分化障害

研究概要

BTK遺伝子のexon6～exon19領域、隣接遺伝子であるTIMM8Aの全遺伝子およびGFP-Hyg耐性遺伝子を搭載したHD-Ad.AAV.BTKベクターを作製した。同ベクターを男性pre-B ALL由来細胞株であるNalm6に感染させ、Hyg耐性株を得た。PCR法によりScreeningを行い、Southern blottingにより相同組換えを証明した。また正常男性ヒト臍帯血由来CD34陽性細胞に本ベクターを感染させ、ベクターゲノムのIntegrationを証明した。

研究成果

• [雑誌論文] T Cell Leukemia/Lymphoma 1 and Galectin-1 Regulate Survival/Cell Death Pathways in Human Naive and IgM+ Memory B Cells through Altering Balances in Bcl-2 Family Proteins (2009)
  • 著者名/発表者名: Tabrizi SJ, Niiro H, Masui M, Yoshimoto G, Iino T, Kikushige Y, Wakasaki T, Baba E, Shimoda S, Miyamoto T, Hara T, Akashi K
  • 雑誌名: J Immunol ページ: 1490-1499
• [雑誌論文] Molecular explanation for the contradiction between systemic Th17 defect and localized bacterial infection in 75kDa anti-BTK anti-b-Actin WT 1 9 15 23 34 44 46 50kDa 37kDa 1kb+ 1 9 15 23 34 44 46 WT A B 2000 bp 1650 bp hyper-IgE syndrome. (2009)
  • 著者名/発表者名: Minegishi Y, Saito M, Nagasawa M, Takada H, Hara T, Tsuchiya S, Agematsu K, Yamada M, Kawamura N, Ariga T, Tsuge I, Karasuyama H
  • 雑誌名: J Exp Med. 206 ページ: 1291-301
• [雑誌論文] FBP17 Mediates a Common Molecular Step in the Formation of Podosomes and Phagocytic Cups in Macrophages. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsuboi S, Takada H, Hara T, Mochizuki N, Funyu T, Saitoh H, Terayama Y, Yamaya K, Ohyama C, Nonoyama S, Ochs HD
  • 雑誌名: J Biol Chem. 284 ページ: 8548-56
• [学会発表] BTK gene repair by homologous recombination using helper-dependent adenovirus/adeno-associated virus hybrid vector. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishimura M, Doi T, Takada H, Ohga S, Hara T
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20091202-20091204
• [学会発表] ヘルパー依存型アデノ・アデノ随伴ウイルスハイブリッドベクターを用いた相同組換えによるBTK遺伝子修復研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石村匡崇、落合正行、山本裕之、古和温子、土居岳彦、高田英俊、大賀正一、楠原浩一、中津可道、續輝久、相澤絵美、三谷幸之介、原寿郎
  • 学会等名: 第51回日本小児血液学会・第25回日本小児がん学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20091127-20091130
• [学会発表] ヘルパー依存型アデノ・アデノ随伴ウイルスハイブリッドベクターを用いた相同組換えによるBTK遺伝子修復研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石村匡崇、落合正行、山元裕之、古和温子、土居岳彦、高田英俊、大賀正一、楠原浩一、中津可道、續輝久、相澤絵美、三谷幸之介、原寿郎
  • 学会等名: 第37回日本臨床免疫学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20091113-20091115
• [学会発表] ヒト化マウスにおけるヒトB細胞解析と新規XLAマウスモデル確率への応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 土居岳彦、高田英俊、金兼弘和、宮脇利男、原寿郎
  • 学会等名: 第112回日本小児科学会
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 20090417-20090419
• [学会発表] Rapid diagnostic system of primary immunodeficiency diseases in Japan (2009)
  • 著者名/発表者名: Hangzhou
  • 学会等名: Hara T The 5th ASPR
  • 発表場所: China
  • 年月日: 2009-05-22
• [図書] 免疫疾患 (2010)
  • 著者名/発表者名: 寿郎
  • 出版者: 標準小児科学(印刷中)
• [備考] ホームページ等なし