研究概要 |
【目的】近年、大腸癌・乳癌・肝臓癌などにおいて癌幹細胞の存在およびその特性についての解明がなされており,癌幹細胞の有力なマーカーとしてCD133抗原が考えられている.口腔扁平上皮癌の幹細胞同定とその特性の解明は、新規の診断や分子標的治療となる可能性があり,未分化細胞のまれな集団が腫瘍の形成と維持に関与することを示す証拠が増加しつつあるが、口腔扁平上皮癌においてはこのことは検討されていない. そこで初年度においては、我々は口腔扁平上皮癌由来細胞株を用いて口腔扁平上皮癌における癌幹細胞の存在およびその特性について検討した. 【材料および方法】口腔扁平上皮癌由来細胞株(OSCC)KO細胞を使用した.CD133抗体を用いてCD133陽性細胞を分離し、血清を用いずに未分化性を長期間、継代・維持できる無血清培養系の確立を試みた.またCD133陽性細胞より抽出したRNAを用いて各種未分化マーカーの発現についてRT-PCRにて解析を行い,マイクロアレイおよびReal-time RT-PCRによってCD133陽性細胞に特異的に発現する遺伝子を検討した.臨床的な関連を調べるため免疫組織化学的検討も併せて行った. 【結果】OSCCより分離したCD133陽性細胞はRT-PCRにより未分化マーカーの発現が認めら れた.また遺伝子発現解析によりVEGF,IL-8,IL-24などの遺伝子が親細胞に比べて高発現しておりReal-time RT-PCRでもこれらの遺伝子の高発現が確認された. 【結論】マイクロアレイとReal-time RT-PCR法を用いた発現解析によって、CD133陽性細胞と非分離細胞の間にVEGF,IL-8,IL-24遺伝子の発現に大きな相違がみられ,これら遺伝子の発現により腫瘍の成長・血管新生能・転移能が高いことが示唆されOSCCにおいてもCD133陽性細胞が癌幹細胞的特徴を有していることが明らかとなった。来年度は、初年度に明らかとなった癌幹細胞様細胞で高発現、あるいは低発現している遺伝子群の機能について詳細に検討する予定である。
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