バイオリソース事業の展開に必須の、高圧法を用いた万能型受精卵凍結法の開発

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19500364
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 越本 知大 宮崎大学, フロンティア科学実験総合センター, 教授 (70295210)
• 研究分担者: 葛西 孫三郎 高知大学, 教育研究部自然科学系, 教授 (60152617) ; 枝重 圭祐 高知大学, 教育研究部自然科学系, 教授 (30175228)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: 凍結保存

研究概要

多様な哺乳動物バイオリソース維持の費用対効果と確実性を高める支援技術として、高圧法を用いた生殖細胞の万能凍結保存の開発に着手した。電顕試料固定に用いられる高圧ガラス化凍結法を基礎に、大型の生殖細胞に応用するために、細胞毒性の低い凍結溶液条件を決定した。また融解時の脱ガラス化問題を克服するための物理条件測定系と微小チャンバーの改良を行い、本法の胚凍結保存技術としての可能性を示した。

研究成果

• [雑誌論文] Maintenance of fertility in cryopreserved Indian gerbil (Tatera indica) spermatozoa. (2009)
  • 著者名/発表者名: C. Koshimoto, D. Watanabe, A. Shinohara, T. Morita
  • 雑誌名: Cryobiology 58(3) ページ: 303-307
• [雑誌論文] The role of aquaporin3 in the movement of water and cryoprotectants in mouse morulae. (2007)
  • 著者名/発表者名: K. Edashige, S. Ohta, M. Tanaka, T. Kuwano, D.M. Valdez Jr., T. Hara, B. Jin, S. Takahashi, S. Seki, C. Koshimoto, M. Kasai
  • 雑誌名: Biol. Reprod. 77(2) ページ: 365-75
• [学会発表] 胚の高圧ガラス化凍結法開発に関する研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田亜里砂, 澤口朗, 井手惣幸, 後藤嘉輝, 森田哲夫, 篠原明男, 越本知大
  • 学会等名: 第27回九州実験動物研究会
  • 発表場所: 熊本市
  • 年月日: 2009-11-14
• [学会発表] 精子回収液の違いがマウス精子の凝集に及ぼす影響 (2009)
  • 著者名/発表者名: 細川由起, 澤口朗, 篠原明男, 越本知大
  • 学会等名: 第27回九州実験動物研究会
  • 発表場所: 熊本市
  • 年月日: 2009-11-14
• [学会発表] Permeability to water and cryoprotectants of zebrafish (Danio rerio) oocytes at mid stage III (2008)
  • 著者名/発表者名: D.M. Valdez, Jr., R. Tsuchiya, S. Seki, N. Saida, C. Koshimoto, M. Kasai, K. Edashige
  • 学会等名: 45th Annual Meeting of the Society for Cryobiology "CRYO 08"
  • 発表場所: Charlotte, NC, USA
  • 年月日: 20080720-20080723
• [学会発表] Effects of Raffinose Concentration and Methyl-s-cyclodextrin on IVF with Cryopreserved C57BL/6 Sperm (2008)
  • 著者名/発表者名: K. Mochida, C. Koshimoto, K. Edashige, K. Aizawa, K. Taguma, A. Ohta, A. Ogura
  • 学会等名: 5th Annual Meeting of the Society for Cryobiology "CRYO 08"
  • 発表場所: Charlotte, NC
  • 年月日: 20080720-20080723
• [学会発表] C57BL/6系統マウス凍結精子におけるラフィノース濃度と浸透圧の生存性への影響について (2008)
  • 著者名/発表者名: 持田慶司, 相澤健太郎, 田熊究一, 金田秀貴, 越本知大, 枝重圭祐, 太田昭彦, 若菜茂晴, 小倉淳郎
  • 学会等名: 第55回日本実験動物学会
  • 発表場所: 仙台市
  • 年月日: 20080515-20080517
• [学会発表] 凍結マウス精子の耐凍剤希釈・遠沈処理による精子回収率と運動性の改善に関する検討 (2008)
  • 著者名/発表者名: 細川由起, 篠原明男, 持田慶司, 枝重圭祐, 越本知大
  • 学会等名: 第55回日本実験動物学会
  • 発表場所: 仙台市
  • 年月日: 20080515-20080517
• [学会発表] 近交系マウス凍結融解精子の培養地へのmethyl-β-cyclodextrin添加の影響 (2008)
  • 著者名/発表者名: 林和足, 篠原明男, 越本知大
  • 学会等名: 第26回九州実験動物研究会
  • 発表場所: 佐賀市
  • 年月日: 2008-11-15
• [学会発表] マウス精液中に見られる精子凝集塊に関する研究 (2008)
  • 著者名/発表者名: 細川由起, 澤口朗, 篠原明男, 越本知大
  • 学会等名: 第26回九州実験動物研究会
  • 発表場所: 佐賀市
  • 年月日: 2008-11-15
• [学会発表] Simple technique to improve motility and fertility in frozen C57BL/6J mouse sperm. (2007)
  • 著者名/発表者名: C. Koshimoto, Y. Shichi, K. Edashige, M. Kasai, K. Mochida, A. Shinohara
  • 学会等名: 44th Annual Meeting of the Society for Cryobiology "CRYO 07"
  • 発表場所: Lake Leuise, Alberta, Canada
  • 年月日: 20070728-20070731
• [学会発表] The Role of Aquaporin 3 in the Movement of Water and Cryoprotectants in Mouse Morulae. (2007)
  • 著者名/発表者名: K. Edashige, S. Ohta, M. Tanaka, T. Kuwano, D.M. Valdez Jr., T. Hara, B. Jin, S. Takahashi, S. Seki, C. Koshimoto, M. Kasai
  • 学会等名: The 5th International Conference of Aquaporin
  • 発表場所: Nara, Japan
  • 年月日: 20070713-20070716