| 研究概要 |
(融合蛋白質の作製)chitin binding domain(ChiBD)/cellulose binding domain(cellBD)とfibroblast growth factor-2(FGF-2)/bone morphogenetic protein-2(BMP-2)の融合蛋白質発現プラスミドを作製し、大腸菌にトランスフォーメーションした。常法により、大腸菌で発現し、細胞破砕液上清より精製し、ChiBD-FGF2,CellBD-FGF2,ChiBD-BMP2,CellBD-BMP2を得た。
(キチンおよびセルロースバイオマテリアルへの結合性)すでに報告した方法によって、キチン/セルロースバイオマテリアルを作製した。上記のChiBD,CellBDをもつ融合蛋白質のバイオマテリアルへの結合性を見たところ、特異性を持って結合することを確認した。
(キチン/セルロースパターニングバイオマテリアルへのローカルデリバリー)パターニングしたバイオマテリアルへ任意の量比で混合したChiBD-BMP2,CellBD-BMP2を加えたところ、パターンに沿ってローカルデリバリーされる量比を変化できることがわかった。
(ChiBD-FGF2を結合したキチンバイオマテリアル上での細胞挙動)ChiBD-FGF2を結合したキチンバイオマテリアル上での細胞挙動を見た。キチン領域では細胞が伸展/増殖したが、それ以外の領域ではできなかった。また、細胞はキチン領域に沿って、遊走した。遊走は平面ばかりでなく、平面培養から立体的に成形したスポンジへも観察された。
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