細胞内情報経路を標的としたハイスループット型リン酸化タンパク質分離材料の創製

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19560760
• 研究機関: 北九州市立大学
• 研究代表者: 上江洲 一也 北九州市立大学, 国際環境工学部, 教授 (40253497)
• 研究分担者: 河野 智謙 北九州市立大学, 国際環境工学部, 准教授 (20335699)
• キーワード: リン酸化タンパク質 / W / O / W型界面鋳型重合法 / 金属固定化アフィニティークロマトグラフィー / Zr(IV)イオン / 樹脂孔表面 / リン酸化ペプチド / 孔径 / 溶離条件の最適化

研究概要

リン酸基と相互作用の強いZr(IV)イオンに着目し、 W/O/W型界面鋳型重合法を用いて、樹脂孔表面にZr(IV)を固定させた新規金属固定化アフィニティークロマトグラフィー(Zr-Phos IMAC)を調製し、リン酸化タンパク質分離性能評価を行った。電気泳動法を用いたモデルタンパク質(BSA及びβ-Casein)の検出法では、従来のIMACよりもリン酸化タンパク質分離能が高いことが確認された。
マトリックス支援レーザー脱離イオン化法(MALDI-TOF/MS)を用いたモデルタンパク質の分離評価では、従来のIMACよりも非リン酸化ペプチドの検出を軽減させ、リン酸化ペプチドの検出感度を向上させることに成功した。今後は、モデルタンパク質以外のリン酸基の数および配置の異なるリン酸化タンパク質を、特異的に認識するように、樹脂内の表面構造および孔径を制御した樹脂を充填したカラムにおいて、試料添加条件、カラムの洗浄条件、リン酸化タンパク質の溶離条件等の最適化を検討する必要がある。

研究成果

• [雑誌論文] Interaction of boric acid with salicyl derivatives as an anchor group of boron-selective adsorbents (2008)
  • 著者名/発表者名: Y. Miyazaki, H. Matsuo, T. Fujimori, H. Takemura, S. Matsuoka, T. Okobira, K, Uezu., K. Yoshimura
  • 雑誌名: Polyhedron 27 ページ: 2785-2790
  • 査読あり
• [雑誌論文] シリーズ解説「イオン交換と計算化学」第5回金属錯体の構造解析と安定性評価 (2007)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也
  • 雑誌名: イオン交換学会誌 18 ページ: 14-20
• [雑誌論文] シリーズ解説「イオン交換と計算化学」第6回(最終回)多糖と核酸との複合体の構造解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也, 大河平紀司
  • 雑誌名: イオン交換学会誌 18 ページ: 75-82
• [雑誌論文] Computational Chemistry in Solvent Extraction (2007)
  • 著者名/発表者名: K. Uezu, K. Yoshizuka
  • 雑誌名: Solvent Extraction Research and Development, Japan 14 ページ: 1-15
• [雑誌論文] 受賞論文(平成18年度日本イオン交換学会進歩賞)分子認識部位の設計とイオン交換機構を解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也, 大河平紀司
  • 雑誌名: イオン交差学会誌 18 ページ: 100-109
• [学会発表] Immobilized zirconium ion affinity chromatography for specific enrichment of phosphoproteins (2008)
  • 著者名/発表者名: H. Mizuki. T. Kawano, K. Uezu.
  • 学会等名: The 3rd Japan-Taiwan Joint International Symposium on Environmental Science and Technology : Environmental Chemistry, Bioscience and Managements
  • 発表場所: Kitakyushu, Japan. .
  • 年月日: 20081200
• [学会発表] Specific capture of phosphoprotein by surface-templated resin (2008)
  • 著者名/発表者名: H. Mizuki. T. Kawano, K. Uezu.
  • 学会等名: The 21^<th> Symposium on CHEMICAL ENGINEERING
  • 発表場所: Saga, Japan. .
  • 年月日: 20081200
• [学会発表] Immobilized zirconium ion affinity chromatography for specific enrichment of phosphoproteins (2008)
  • 著者名/発表者名: H. Mizuki, T. Kawano, K. Uezu.
  • 学会等名: The first Japan-Korea joint symposium on bio-microsensing technology
  • 発表場所: Kitakyushu, Japan. .
  • 年月日: 20081100
• [学会発表] Immobilized Zr(IV) affinity chromatography prepared by surface template polymerization for specific capturing phosphorylated proteins (2008)
  • 著者名/発表者名: H. Mizuki, T. Kawano, K. Uezu
  • 学会等名: The Fifth International Workshop on Molecular Imprinting
  • 発表場所: Kobe, Japan
  • 年月日: 20080800
• [学会発表] Specific capture of phosphoprotein by immobilized Zirconium ion affinitychromatography (2008)
  • 著者名/発表者名: H. Mizuki. T. Kawano, K. Uezu.
  • 学会等名: 4th International Symposium on Plant Neurobiology
  • 発表場所: Fukuoka, Japan.
  • 年月日: 20080600
• [図書] ポリオールヘのアンチモン吸着機構(連載第9回、最終回) (2008)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也
  • 総ページ数: No. 10,5-7
  • 出版者: WAKO Infomatic World
• [図書] 「貴金属・レアメタルのリサイクル技術集成」第2編 レアメタル 第9節 アンチモン (2007)
  • 著者名/発表者名: 川喜田英孝, 上江洲一也
  • 総ページ数: 373-387
  • 出版者: 株式会社エヌ・ティー・エス
• [図書] 思考のツールとしての計算化学(連載第1回) (2007)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也
  • 総ページ数: No. 1,2-4
  • 出版者: WAKO Infomatic World
• [図書] 新しい□-(1→3)-グルカン内水素結合の発見(連載第2回) (2007)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也
  • 総ページ数: No. 3,5-6
  • 出版者: WAKO Infomatic World
• [図書] A1(III)とIn(III)の分離のための□-ジケトン誘導体の分子設計(連載第3回) (2007)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也
  • 総ページ数: No. 5,5-7
  • 出版者: WAKO Infomatic World
• [図書] 分子集合体のシミュレーション(連載第5回) (2007)
  • 著者名/発表者名: 上江洲一也
  • 総ページ数: No. 6,6-7
  • 出版者: WAKO Infomatic World