|
1) ジベレリン受容体GID1の構造を、X線結晶解析により明らかにした。その結果、GID1は、α、β-ハイドロラーゼと同様な構造をもち、その活性中心に対応する部分でジベレリンと結合していること、活性中心にかぶさる蓋があり、その部分でSLR 1と結合していることが明らかとなった。さらに、シダ型に対応する変異型GID1が、結晶構造から類推すると不活性型ジベレリンに対してより結合活性を示すことが予想できた。実際、その部分をシダ型にかえた変異型GID1を作成し、その不活性型ジベレリンに対する結合能を調べたところ、たしかに結合活性が高まっていることが示された。このことは、GID1が、進化の過程でしだいに活性型ジベレリンのみを認識し、活性型ジベレリンに高い結合活性を示すように変化していったという考え方を支持するものであった。
2) in vitroにおけるGID1受容体とGAの結合様式、GA存在下におけるGID1受容体とSLR 1タンパク質との結合様式についてビアコアを用いて解析した。その結果、GID1、SLR 1の結合に関する結合定数等を求めることが出来、その値は、in vivoにおける現象を十分説明できるものであった。
3) 今までの研究によりGID1はジベレリン受容体として機能し、GAと結合したGID1受容体は、抑制因子であるDELLAタンパク質と結合し、SCF^<GID2>を介してDELLAタンパク質を分解に導くことによりGA応答が起きていることが明らかになってきた。ところが、gid 2欠損変異体では、DELLAタンパク質が分解されないにもかかわらず、GA応答が一部起きていることが分ってきた。この応答は、ジベレリン、GID1量依存的であった。これらのことから、このGA応答は、gid 2変異体で、GID1-GA-SLR 1コンプレックスが形成されるとSLR 1の抑制活性が失われるからであると結論した。
|
