シークエンスキャプチャー法による生理活性ペプチド遺伝子の効率的なクローニング

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19570063
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 形態・構造
• 研究機関: 東邦大学
• 研究代表者: 岩室 祥一 東邦大学, 理学部, 准教授 (70221794)
• 研究分担者: 菊山 榮 早稲田大学, 教育・総合科学学術院, 名誉教授 (20063638) ; 小林 哲也 埼玉大学, 理工学研究科, 准教授 (00195794)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• キーワード: 動物形態

研究概要

本研究では、両生類の皮膚から抗菌性のペプチドの単離を行なうとともに、その効率的な遺伝子クローニング法の開発を行なった。その結果、日本産の数種類のカエルから有用な抗菌ペプチド及びその配列を多数見つけ出すとともに、抗菌ペプチド遺伝子の発現には甲状腺ホルモンが重要であることを示した。また、ヒストンH2Bという本来は細胞の核にあるタンパク質がカエルの皮膚から得られていることに基づき、その抗菌メカニズムを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Developmental and thyroid hormone induced expression of preprotemporin genes in the skin of Japanese mountain brown frog Rana ornativentris (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohnuma A, Conlon JM, Iwamuro S
  • 雑誌名: Annals NY Acad Sci (in press)
• [雑誌論文] Dermal cytolytic peptides and the system of innate immunity in anurans (2009)
  • 著者名/発表者名: Conlon JM, Iwamuro S, King JD
  • 雑誌名: Annals NY Acad Sci (in press)
• [雑誌論文] Demonstration of the proopiomelaocortin signalling system in the primary immune organ, the bursa of Fabricius, of the quail (2009)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Takaso A, Tanaka S, Amano M, Takahashi A, Iwamuro S, Machida, T
  • 雑誌名: Annals NY Acad Sci (in press)
• [雑誌論文] Potential roles of histones in host defense as antimicrobial agents (2008)
  • 著者名/発表者名: Kawasaki H, Iwamuro S
  • 雑誌名: Infectious Disorder-Drug Targets 8 ページ: 195-205
• [雑誌論文] Antimicrobial action of histone H2B in Escherichia coli : evidence for membrane translocation and DNA-binding of a histone H2B fragment after proteolytic cleavage by outer membrane proteinase T (2008)
  • 著者名/発表者名: Kawasaki H, Koyama T, Conlon JM, Yamakura F, Iwamuro S
  • 雑誌名: Biochimie 90 ページ: 1693-1702
• [雑誌論文] Molecular cloning of a cDNA encoding atypical antimicrobial and cytotoxic brevinin-1Ja from the skin of the Japanese brown frog, Rana japonica (2008)
  • 著者名/発表者名: Koyama T, Iwamuro S
  • 雑誌名: Zool Sci 25 ページ: 487-491
• [雑誌論文] Characterization of a hemolytic protein, identified as histone H4, from the skin of the Japanese tree frog Hyla japonica(Hylidae) (2008)
  • 著者名/発表者名: Kawasaki H, Iwamuro S, Goto Y, Nielsen Per F, Conlon JM
  • 雑誌名: Comp Biochem Phys B 149 ページ: 120-125
• [雑誌論文] Evidence that the genes encoding the melittin-related peptides in the skins of the Japanese frogs Rana sakuraii and Rana tagoi are not orthologous to bee venom melittin genes : developmental-and tissue-dependent gene expression (2007)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H, Conlon JM, Iwamuro, S
  • 雑誌名: Peptides 28 ページ: 2061-2068
• [雑誌論文] Cytolytic peptides belonging to the brevinin-1 and brevinin-2 families isolated from the skin of the Japanese brown frog, Rana dybowskii (2007)
  • 著者名/発表者名: Conlon JM, Kokodziejek J, Nowotny N, Leprince J, Vaudry H, Coquet L, Jouenne T, Iwamuro S
  • 雑誌名: Toxicon 50 ページ: 746-756
• [雑誌論文] Expression of the estrogen receptor a gene in the anal fin of Japanese medaka, Oryzias latipes, by environmental concentrations of bisphenol A (2007)
  • 著者名/発表者名: Hayashi H, Nishimoto A, Oshima N, Iwamuro S
  • 雑誌名: J Toxicol Sci 32 ページ: 91-96
• [学会発表] 対馬産Rana属皮膚抗菌ペプチドの遺伝子クローニング (2009)
  • 著者名/発表者名: 秋葉貴久、安藤麻理、Conlon JM、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会関東支部第61回大会
  • 発表場所: 埼玉大学
  • 年月日: 2009-03-20
• [学会発表] ウシガエルハーダー腺における抗菌ペプチド遺伝子の発現 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小西健司、蓮沼至、小林哲也、岡田令子、中野真樹、白間一彦、菊山榮、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会関東支部第61回大会
  • 発表場所: 埼玉大学
  • 年月日: 2009-03-20
• [学会発表] ゲノム情報から両生類抗菌ペプチド遺伝子の発現調節機構を探る (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮崎希、太枝志帆、竹山留美子、大沼彩、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会関東支部第61回大会
  • 発表場所: 埼玉大学
  • 年月日: 2009-03-20
• [学会発表] 無尾目両生類皮膚腺の形態学的解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 丸橋佳織、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会関東支部第61回大会
  • 発表場所: 埼玉大学
  • 年月日: 2009-03-20
• [学会発表] 鳥類血球系及び免疫系からのCathelicidin遺伝子のクローニング (2009)
  • 著者名/発表者名: 椿卓、小林哲也、稲嶺由羽、菊山榮、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会関東支部第61回大会
  • 発表場所: 埼玉大学
  • 年月日: 2009-03-20
• [学会発表] Molecular cloning and developmental expression of genes encoding antimicrobial peptide precursors in Rana ornativentris (2008)
  • 著者名/発表者名: Iwamuro S, Oeda S, Miyazaki N, Conlon JM, Ohnuma A
  • 学会等名: The 24th Conference of European Comparative Endocrinologists 2008, Genoa, Italy
  • 発表場所: Centro Congressi Magazzini del Cotone Centro Congressi Magazzini del Cotone
  • 年月日: 20080901-06
• [学会発表] Identification of Des-acetyl-alpha-melanocyte-stimulating hormone in the quail bursa of Fabricius (2008)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Takaso A, Tanaka S, Amano M, Takahashi A, Iwamuro S, Machida T
  • 学会等名: The 24th Conference of European Comparative Endocrinologists 2008, Genoa, Italy
  • 発表場所: Centro Congressi Magazzini del Cotone
  • 年月日: 20080901-06
• [学会発表] ヒストンH2Bの抗大腸菌作用機序の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 岩室祥一、川崎広明、山倉文幸、Conlon J M.
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会(BMB2008)
  • 発表場所: 神戸国際展示場
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] 両生類皮膚抗菌ペプチドの遺伝子発現とその甲状腺ホルモンによる関与 (2008)
  • 著者名/発表者名: 岩室祥一、太枝志帆、鈴木啓恵、大沼彩
  • 学会等名: 第33回日本比較内分泌学会大会
  • 発表場所: 広島大学
  • 年月日: 2008-12-04
• [学会発表] ニホンアカガエル新規抗菌ペプチドBrevenin-1Ja (2008)
  • 著者名/発表者名: 岩室祥一、小山卓己
  • 学会等名: 第60回日本動物学会関東支部大会
  • 発表場所: 東京大学
  • 年月日: 2008-03-22
• [学会発表] ニホンアカガエル抗菌ペプチドの遺伝子クローニングとその解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小山卓己、岩室祥一
  • 学会等名: 第60回日本動物学会関東支部大会
  • 発表場所: 東京大学
  • 年月日: 2008-03-22
• [学会発表] 微生物を撃て! -カエルの抗菌ペプチド (2007)
  • 著者名/発表者名: 岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会第78回大会シンポジウム「両生類はワンダーランド」
  • 発表場所: 弘前大学
  • 年月日: 2007-09-22
• [学会発表] ヤマアカガエル抗菌ペプチドの遺伝子クローニングとそのステージ依存的な発現 (2007)
  • 著者名/発表者名: 大沼彩、鈴木啓恵、Conlon, JM、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会第78回大会
  • 発表場所: 弘前大学
  • 年月日: 2007-09-20
• [学会発表] 組換え体ヒストンH2Bの抗大腸菌作用機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 川崎広明、Conlon JM、小林哲也、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会第78回大会
  • 発表場所: 弘前大学
  • 年月日: 2007-09-20
• [学会発表] ニホンアカガエル由来抗菌ペプチドJaponicinの遺伝子クローニング及び局在解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 小山卓己、Conlon JM、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会第78回大会
  • 発表場所: 弘前大学
  • 年月日: 2007-09-20
• [学会発表] アカガエル属抗菌ペプチドTemporinの遺伝子解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 太枝志帆、大沼彩、竹山瑠美子、Conlon JM、岩室祥一
  • 学会等名: 日本動物学会第78回大会
  • 発表場所: 弘前大学
  • 年月日: 2007-09-20