高選択的JNK1阻害剤創出を目指した超高分解能X線及び中性子線構造解析

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19570111
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 大阪府立大学
• 研究代表者: 木下 誉富 大阪府立大学, 理学系研究科, 准教授 (90405340)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• キーワード: JNK1 / 阻害剤 / X線結晶構造解析 / 中性子線構造解析 / ドラッグデザイン

研究概要

研究目的達成のために必須となる大型結晶の調製には、高純度JNK1サンプルの安定的かつ大量供給が成功のカギとなる。不安定要因である7つのシステイン残基をすべてアミノ酸置換することで、安定なJNK1サンプルの大量供給を可能にした。スクリーニングの結果から、微小結晶(20μm程度)を得た。X線回折予備実験を行い、4Å分解能までの回折点を観測した。今後、実験を継続して超高分解能及び中性子構造解析実験を進め、高選択的JNK1阻害剤を創出する。

研究成果

• [雑誌論文] Crystal structure of human mono-phosphorylated ERK1 at Tyr204 (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Kinoshita, I. Yoshida, S. Nakae, K. Okita, M. Gouda, M. Matsubara, K. Yokota, H. Ishiguro, T. Tada
  • 雑誌名: Biochem. Biopys. Res. Commun. 377 ページ: 1123-1127
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallization of porcine pancreatic elastase and preliminary neutron diffraction experiment (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Kinoshita, T. Tamada, K. Imai, K. Kurihara, T. Ohhara, T. Tada, R. Kuroki
  • 雑誌名: Acta Cryst. F63 ページ: 315-317
  • 査読あり
• [雑誌論文] X線結晶構造解析からStructure-Based Drug Designへの応用と展開 (2007)
  • 著者名/発表者名: 木下誉富
  • 雑誌名: 日本薬理学会誌くすりとからだ 129-3 ページ: 186-190
• [雑誌論文] 開発候補化合物探索での構造情報(X線結晶構造解析)の利用 (2007)
  • 著者名/発表者名: 木下誉富
  • 雑誌名: メディカル・サイエンス・ダイジェクト 33-10 ページ: 18-21
• [雑誌論文] Combined high-resolution neutron and X-ray analysis of inhibited elastase confirms the active-site oxyanion hole but rules against a low-barrier hydrogen bond
  • 著者名/発表者名: T. Tamada, T. Kinoshita, K. Kurihara, M. Adachi, T. Ohhara, K. Imai, R. Kuroki, T. Tada
  • 雑誌名: J. Am. Chem. Soc. (in press)
  • 査読あり
• [学会発表] 中性子構造解析を目的とした変異体human c-Jun N-terminal kinaseの結晶調製法の探索 (2009)
  • 著者名/発表者名: 仲庭哲津子、井上達矢、木下誉富、多田俊治、安達基泰、玉田太郎、黒木良太
  • 学会等名: 第9回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 熊本市
  • 年月日: 2009-05-21
• [学会発表] アデノシンデアミナーゼ阻害剤のStructure-Based Drug Design (2008)
  • 著者名/発表者名: 木下誉富
  • 学会等名: 先端科学セミナー京都ケミカルバイオロジーシンポジウム
  • 発表場所: 京都府立大学
  • 年月日: 2008-12-15
• [学会発表] ハイブリッド型SBDD : アデノシンデアミナーゼ阻害剤の創出 (2007)
  • 著者名/発表者名: 木下誉富
  • 学会等名: CBI学会第280回研究講演会「酵素阻害剤開発におけるSBDDの最前線」
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 2007-12-05
• [学会発表] エラスターゼおよび薬物候補化合物複合体の中性子構造解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 玉田太郎、木下誉富、大原高志、栗原和男、多田俊治、黒木良太
  • 学会等名: 日本中性子科学会第7回年会
  • 発表場所: 九州大学
  • 年月日: 2007-11-28
• [学会発表] Structure-Based Drug Designの新展開-エラスターゼを題材として- (2007)
  • 著者名/発表者名: 木下誉富、多田俊治、今井啓祐
  • 学会等名: 第7回蛋白質科学会ワークショップ「歩き始めた新しい構造研究プローブ」
  • 発表場所: 仙台市
  • 年月日: 2007-05-25
• [学会発表] エラスターゼおよび薬剤候補化合物複合体の中性子構造解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 玉田太郎、木下誉富、多田俊治、栗原和男、大原高志、黒木良太
  • 学会等名: 第7回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 仙台市
  • 年月日: 2007-05-25
• [図書] X線結晶構造解析を利用した医薬品創出、タンパク質結晶の新展開-新しい育成技術から構造解析・応用研究へ (2008)
  • 著者名/発表者名: 木下誉富(著者分担)
  • 総ページ数: 205-214
  • 出版者: シーエムシー出版
• [備考] 「強い中性子で夢の成果太陽系の起源解明、がん治療」、日本原子力研究開発機構、大阪府立大学、京都薬科大学、平成19年7月10日 コメント掲載(東京新聞、中日新聞(WEB版)に掲載)
• [産業財産権] 新規化合物、リン酸化阻害剤、インスリン抵抗性改善剤、及び糖尿病の予防乃至治療剤、並びに、スクリーニング方法 (2009)
  • 発明者名: 木下誉富(大阪府立大学)、土井健太郎、朝永惇、杉山肇、和田睦世(以上、富士通株式会社)
  • 権利者名: 木下誉富(大阪府立大学)、土井健太郎、朝永惇、杉山肇、和田睦世(以上、富士通株式会社)
  • 産業財産権番号: 特願2009039997号
  • 出願年月日: 2009-02-23