マルチヘム型一酸化窒素還元酵素を用いたプロトンポンプ分子進化過程の解明

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19570125
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 片岡 邦重 金沢大学, 物質化学系, 准教授 (40252712)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: マルチヘム型一酸化窒素還元酵素 / プロトンポンプ / 分子進化

研究概要

プロトンポンプの分子進化過程を明らかにするために,一酸化窒素還元酵素(NOR)の異種発現系を構築し,ヘムb3-FeB複核活性中心を構成するFeB配位残基に変異を導入した。Glu190, Glu194及びGlu259を対象にAla, Asp, Gln置換変異体を作製したところ,何れの変異体も複核中心の形成が阻害され,これらの残基がNORの活性中心形成に重要であることが明らかになった。また,NORの生理的電子供与体を検索し,3種類の可溶性Cytcを単離することに成功した。

研究成果

• [学会発表] 脱窒菌一酸化窒素還元酵素の複核中心近傍に存在する酸性アミノ酸残基の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 正田宗大
  • 学会等名: 平成21年度日本化学会近畿支部会北陸地区研究発表会
  • 発表場所: 北陸先端科学技術大学院大学(石川県)
  • 年月日: 2009-11-28
• [学会発表] 脱窒菌の可溶性cyt cの精製と電子受容タンパク質との反応 (2009)
  • 著者名/発表者名: 早川慎二
  • 学会等名: 平成21年度日本化学会近畿支部会北陸地区研究発表会
  • 発表場所: 北陸先端科学技術大学院大学(石川県)
  • 年月日: 2009-11-28
• [学会発表] 変異導入と電子供与体との反応によるHalomonas halodenitirificans一酸化窒素還元酵素の機能解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 正田宗大
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(兵庫県)
  • 年月日: 2009-10-22
• [学会発表] Halomonas halodenitrificansの一酸化窒素還元酵素欠損株の作製と性質 (2009)
  • 著者名/発表者名: 片岡邦重
  • 学会等名: 日本農芸化学会2009年度大会
  • 発表場所: マリンメッセ福岡(福岡県)
  • 年月日: 2009-03-29
• [学会発表] E190A変異型一酸化窒素還元酵素の分光学的性質 (2008)
  • 著者名/発表者名: 正田宗大
  • 学会等名: 第58回錯体化学討論会
  • 発表場所: 金沢大学(石川県)
  • 年月日: 2008-09-21