| 研究概要 |
多くの生物にとって,光は代謝や発生・行動など生体内反応を制御するための信号としての役割も果たしている.そのため,生物は多種多様な光受容システムを発達させている.近年,FADを補欠因子とする,アミノ酸残基数100程度の新規青色光受容体タンパク質ドメインであるBLUFドメインが発見され,その部位特異的変異体の分光学的研究により,FADに結合する特定のアミノ酸が青色光受容に重要な役割を果たしていることが明らかになった.青色光受容時にはBLUF分子内において構造変化が起こることが示唆されているが,その詳細は明らかになっていない.本研究は,好熱性ラン色細菌Thermosynechococcus elongatus BP-1由来のBLUFタンパク質であるPixDを研究対象とし,X線結晶解析の手法を用いて,青色光受容時のBLUFタンパク質の構造変化について知見を得ることを目的としている.
平成19年度は,青色光照射下でのPixD結晶の回折実験を行った.具体的には,液体窒素温度で結晶を凍結させる際に青色光照射を行い,凍結した結晶の反射強度データ収集を試みた.用いた非常に多くの結晶は多結晶性反射を示し,データ収集を行うことはできなかったが,いくつかの結晶について回折データ収集に成功した.得られたそれぞれのデータを用いて構造解析・立体構造精密化に着手している.また,青色光照射下で結晶化を行ったところ,結晶の析出は見られなかった.今後は,得られたデータを用いての立体構造解析・精密化を進め,暗状態構造(PDB code: 1x0p)との詳細な比較を行うとともに,青色光照射方法と,結晶化条件の再検討も考慮に入れ,青色光照射下での回折実験を行う必要がある.
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