| 研究概要 |
<内胚葉性器官形成に異常を示す変異体の原因遺伝子のクローニング>
本年度は、内胚葉性器官形成が異常になる変異体(morendo (mor), legato (leg), decrescendo (dec))に関して、原因遺伝子のクローニングを中心に行った。mor変異体は、スクリーニングにより得られた新規な変異体で、leg変異体と同様に内胚葉性器官形成の異常を示す。3種変異体の原因遺伝子を同定するため、変異体(AB系統)を別系統の野生魚(India系統)と掛け合わせ、3世代からなるファミリーを作製した。掛け合わせの際の遺伝的組み換えにより、AB, India系統間で多型を示すマイクロサテライトマーカーを用いて原因遺伝子のマッピングを行った。その結果、mor変異体では原因遺伝子の候補が得られため、現在変異部位を同定するため、野生胚と変異胚の間で遺伝子配列の比較を行っている段階である。また、leg, dec変異体では、詳細なマッピングの結果、原因遺伝子から1cM以内に近づくことに成功した。
<mor, leg変異体表現型の詳細な観察>
mor, leg変異体を、内胚葉性器官が特異的にGFP蛍光を発するトランスジェニックライン(gutGFP)と掛け合わせ、mor, leg変異胚の内胚葉性器官で蛍光蛋白質であるGFPを発現させることを行っている。現在、それぞれの変異体の同定を行い、変異胚を共焦点レーザー顕微鏡により経時的な観察を行っている段階である。
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