研究課題/領域番号 |
19580004
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研究機関 | 鳥取大学 |
研究代表者 |
松本 晃幸 鳥取大学, 農学部, 教授 (60132825)
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研究分担者 |
村上 重幸 財団法人日本きのこセンター, 菌蕈研究所, 上席主任 研究員 (00072794)
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キーワード | 食用担子菌類 / 胞子欠損性変異 / 連鎖解析 / AFLPマーカー / 分子育種 / ウスヒラタケ |
研究概要 |
食用きのこ類の生産過程では、子実体から飛散する大量の胞子が生産現場およびその周辺において人の健康や環境に極めて深刻な悪影響を及ぼし問題となっている。本課題はこの問題の有効な解決策となる無胞子性きのこの育種に向けて、優秀な食用栽培きのこのひとつ、ウスヒラタケ(Pleurouts pulmonarius)の胞子欠損性変異体を材料として、当該変異に関わる遺伝子を解明するとともに、変異と栽培形質との関係に関する遺伝・育種学的情報の取得を目的とする。本年度は変異形質保有が栽培形質に及ぼす影響の検討に供試する野生型および変異型F1株を調製するとともに、変異個体の細胞学的観察、変異形質座乗部位近傍AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)マーカー(0-3.4cM)のSTS化および遺伝連鎖地図おいて推定された当該変異領域のマップベースクローニングを行った。その結果、(1)変異個体の担子器では減数分裂が減数第1分裂の中-終期で停止していることをつきとめた。(2)当該変異領域と密接に連鎖するAFLPマーカーより2種類の変異検出用マーカーを構築した。これら2STSマーカーについて特許申請を行った。(3)野生型TMIC-31664由来の単胞子分離株のゲノムDNAを材料として、フォスミドライブラリーを構築した。ライブラリーより前述の近傍マーカーをDNAプローブとして関連領域保有クローンをスクリーニングし、40kb前後の4個のポジティブクローンを得た。各クローンの塩基配列を決定し、整列化した結果、これらは変異座(0cM)位周辺の約67kbを網羅していた。
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