| 研究概要 |
枯草菌の機能未知転写因子をコードする遺伝子の変異株の生育を網羅的に調べた結果、本研究室で見出されたYofAが細胞分裂を制御する主要な転写調節因子であることが示された。また、YofAは細胞分裂に関与するftsWの転写を、細胞内のエネルギー源の状態を感知し正に制御する重要な因子であることが示唆された。YofAが感知し、 ftsWの転写を活性化する栄養源について調べた結果、グルコース等のC源であることが示された。また、YofAを大腸菌で大量発現させ、これを精製し、ゲルシフト法でftsW上流への結合能を調べたが、結合は認められず、DNA結合にはリガンドが必要であることが示唆された。次にグルコースの中間代謝物を中心にYofAのリガンドとなりうる低分子を探索したが、見出すことはできず、これ以外の中間代謝物も考慮し検討を行う必要があると考えられた。
一方、細胞増殖・分化時の効率的なエネルギー消費のメカニズムを解明するために、エネルギー産生系の入り口にあたるNADH脱水素酵素をコードするndh, yumB, yutJの機能解析を行った。yumBとyutJの発現量は著しく低くndhが主要な酵素をコードしていることが示唆された。これらの遺伝子の増殖・分化における役割は低いと推定されたが、各遺伝子のプロモーターをndhのプロモーターに変換し、これをndh欠損株に導入した結果、ndhの欠損による増殖と細胞分化への影響は解消された。したがって、yumB,yutJの発現量は低いが、ともにタンパク質の構造としては、Ndhと同等の機能を有していることが示された。
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